[發明專利]一種使用α-葡萄糖苷酶制備低聚異麥芽糖的方法

有效

• 申請號: 201310478321.8
• 申請日: 2013-10-14
• 公開（公告）號: CN103497983A
• 公開（公告）日: 2014-01-08
• 發明（設計）人: 周桂榮;周華生;成恒嵩;楊月;戴舒春
• 申請（專利權）人: 無錫健特藥業有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12N11/10
• 代理公司: 北京君智知識產權代理事務所 11305
• 代理人: 向華

1.一種使用α-葡萄糖苷酶制備低聚異麥芽糖的方法，其特征在于該方法的步驟如下：

A、α-葡萄糖苷酶固定化

5～10重量份海藻酸鈉載體用10～20重量份水溶解，得到的溶液進行真空脫氣，然后按照30000～300000IU/5～10克海藻酸鈉，往其脫氣溶液中加入α-葡萄糖苷酶與1～5重量份0.05～0.15mol/LpH4.8～5.2磷酸鹽緩沖液，混合均勻，再滴入以重量計0.4～0.6%CaCl₂凝結液，得到凝結為球形的固定化α-葡萄糖苷酶，接著靜置，離心得到上清液與沉淀物，所述上清液棄去，而所述的沉淀物用0.05～0.15mol/LpH4.8～5.2磷酸鹽緩沖液洗滌至洗液中沒有蛋白質，接著真空抽濾，得到的濾渣是固定化的α-葡萄糖苷酶；

B、連續反應

把步驟A得到的固定化α-葡萄糖苷酶裝入玻璃或不銹鋼柱中，然后把這種柱安裝在自動控制配套設備中，以葡萄糖漿或麥芽糖漿為底物，所述底物按照它與水的體積比1:3～5用水進行稀釋，接著在溫度50～60℃、pH4.5～6.0的反應條件下通過所述的柱，得到連續反應產物溶液；

C、50型低聚異麥芽糖的制備

使用雙效降膜真空濃縮機在真空度0.05～0.15MPa與溫度50～70℃的條件下，對步驟B得到的連續反應產物溶液進行濃縮，得到糖濃度為以重量計60～70%的糖漿，它是50型低聚異麥芽糖漿。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟C中，使用雙效降膜真空濃縮機在真空度0.05～0.15MPa與溫度50～70℃的條件下，對步驟B得到的連續反應產物溶液進行濃縮，得到糖濃度為以重量計20～25%的糖漿，然后使用噴霧干燥機在進口溫度170～200℃與出口溫度160～190℃的條件下進行噴霧干燥，得到50型低聚異麥芽糖粉。

3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于將8～10重量份50型低聚異麥芽糖漿或5～8重量份50型低聚異麥芽糖粉溶解于480～520ml水中，讓得到的溶液先通過陽離子交換樹脂柱，然后通過納濾膜，或者反之；使用雙效降膜真空濃縮機在真空度0.05～0.15MPa與溫度50～70℃的條件下對所得到的溶液進行濃縮，得到糖濃度為以重量計60～70%的糖漿，它是90型低聚異麥芽糖漿。

4.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于將8～10重量份50型低聚異麥芽糖漿或5～8重量份50型低聚異麥芽糖粉溶解于480～520ml水中，讓得到的溶液先通過陽離子交換樹脂柱，然后通過納濾膜，或者反之；使用雙效降膜真空濃縮機在真空度0.05～0.15MPa與溫度50～70℃的條件下，對所得到的溶液進行濃縮，得到糖濃度為以重量計20～25%的糖漿，然后使用噴霧干燥機在進口溫度170～200℃與出口溫度160～190℃的條件下進行噴霧干燥，得到90型低聚異麥芽糖粉。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟A中，使用卡拉膠載體時，5～10重量份鈉型卡拉膠用5～100重量份溫度40～60℃水溶解，然后按照30000～300000IU/5～10克卡拉膠加入α-葡萄糖苷酶與1～5重量份0.05～0.15mol/LpH4.8～5.2磷酸鹽緩沖液，混合均勻，再滴加由0.15mol/LK₂SO₄與以重量計0.1%戊二醛按照重量比1:0.8～1.2組成的凝結液，得到凝結為球形的固定化α-葡萄糖苷酶，接著靜置，離心得到上清液與沉淀物，所述上清液棄去，而所述的沉淀物用0.05～0.15mol/LpH4.8～5.2磷酸鹽緩沖液洗滌至洗液中沒有蛋白質，接著真空抽濾，得到的濾渣是固定化的α-葡萄糖苷酶。