[發明專利]離子排斥色譜法測定發酵酒中有機酸含量的方法

有效

• 申請號: 201310475828.8
• 申請日: 2013-10-12
• 公開（公告）號: CN103543236A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 林曉姿;林曉婕;魏巍;何志剛;李維新;梁璋成;任香蕓
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院農業工程技術研究所
• 主分類號: G01N30/96
• 分類號: G01N30/96
• 代理公司: 福州市鼓樓區京華專利事務所(普通合伙) 35212
• 代理人: 宋連梅

【技術領域】

本發明涉及化學領域中的一種測定方法，尤其涉及一種離子排斥色譜法測定發酵酒中有機酸含量的方法。

【背景技術】

發酵酒是以糧谷、水果、乳類等為原料，主要經酵母發酵等工藝釀制而成的，酒精含量小于24%的飲料酒。主要包括啤酒、葡萄酒、水果酒和黃酒等。

有機酸是酒體的重要組成成分，是酒體產香的前體物質，同時有機酸能增加酒的濃厚感，降低甜度，具有緩沖、協助其他香味成分的重要作用，有機酸的種類、濃度與葡萄酒的類型、品質優劣有很大關系，影響酒的口感、色澤及生物穩定性。黃酒中的有機酸主要包括琥珀酸、乳酸、醋酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、草酸等，適量的酸在黃酒中起到緩沖調和諸味的作用，并在貯存過程中逐步形成芳香酯，但黃酒的酸度過高，會造成黃酒酸敗；酸度過低，會造成黃酒口味淡薄，品質下降。葡萄酒中的有機酸主要包括酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、琥珀酸、乳酸、乙酸等，其中乙酸含量過高則表明在葡萄酒的釀造、儲存過程中已感染雜菌。因此，有機酸的檢測在黃酒和葡萄酒的生產釀造和儲存過程中具有重要的作用。

高效液相色譜法靈敏簡便、選擇性好、準確度高，在分離有機酸得到廣泛應用。目前高效液相色譜法通常使用C18柱分離有機酸，多以磷酸鹽為流動相，操作較為繁瑣，且不利于色譜柱及色譜系統，色譜分離條件參數的優化受到一定的限制，對于某些有機酸的分離度較小。而離子排斥色譜法分離有機酸分離度好，靈敏度高，離子排斥色譜法分離有機酸具有以下優點：極適合于含水基體、對強親水性物質不會造成損失、前處理簡單、有機酸分析幾乎不受無機陰離子干擾。但目前還未見利用離子排斥色譜法測定發酵酒中有機酸含量的相關文獻報道，尤其是對發酵酒中的草酸、馬來酸、檸檬酸、酒石酸、蘋果酸、抗壞血酸、琥珀酸、乳酸、富馬酸、乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸13種有機酸進行含量測定的報道。

【發明內容】

本發明所要解決的技術問題在于提供一種離子排斥色譜法測定發酵酒中有機酸含量的方法。

本發明是通過以下技術方案解決上述技術問題的：一種離子排斥色譜法測定發酵酒中有機酸含量的方法，該方法包括如下具體操作:

（1）標準溶液的配制：分別稱取草酸、馬來酸、檸檬酸、酒石酸、蘋果酸、抗壞血酸、琥珀酸、乳酸、富馬酸、乙酸、丙酸、異丁酸、及丁酸標樣10mg并混合得混合物，之后采用超純水對該混合物進行溶解并定容以獲得標準溶液的母液，且該母液的濃度為1mg/mL，然后利用超純水將母液稀釋成不同濃度梯度的標準溶液，于-40℃下保存備用；

（2）樣品處理：將酒的樣品經過0.45μm濾膜過濾即得待測液；

（3）離子排斥色譜檢測：

在色譜柱上，以體積比為98:2的H₂SO₄溶液-乙腈為流動相，且以0.5mL/min的流速進行梯度洗脫分離，且色譜條件如下：

色譜柱：IC?PAKTM?ION?Exclusion；

流動相：H₂SO₄溶液-乙腈；

柱溫：55℃；

檢測波長：210nm；

進樣量：10μL；

流動相中H₂SO₄溶液濃度的變化過程：0min～40min，H₂SO₄溶液的濃度由0.01mol/L等度梯度上升至0.02mol/L；40min～50min，H₂SO₄溶液的濃度為A0.01mol/L；

（4）測定：分別取制備獲得的標準溶液及待測液，并采用上述色譜條件進行進樣檢測，記錄色譜圖，經過色譜儀器自帶軟件積分得到峰面積，計算分別得到待測液中草酸、馬來酸、檸檬酸、酒石酸、蘋果酸、抗壞血酸、琥珀酸、乳酸、富馬酸、乙酸、丙酸、異丁酸、及丁酸的含量。

進一步地，所述母液利用超純水稀釋成濃度分別為0.2、0.4、0.6、0.8mg/mL的標準溶液。

進一步地，所述樣品處理中的酒指的是黃酒或葡萄酒。

本發明離子排斥色譜法測定發酵酒中有機酸含量的方法的有益效果在于：能夠同時測定樣品中的13種有機酸的含量，而且樣品處理簡單，流動相配制方便易操作，在檢測有機酸的同時避免了現有技術中因使用磷酸鹽而導致的可能析出造成的色譜柱和色譜系統堵塞污染的問題，另外，還具有檢測準確定高、重復性好的特點，進而極大的節省了檢測成本。

【附圖說明】