[發明專利]一種2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶突變體及其應用有效
| 申請號： | 201310473741.7 | 申請日： | 2013-10-12 |
| 公開（公告）號： | CN103642767A | 公開（公告）日： | 2014-03-19 |
| 發明（設計）人： | 咸漠;曹玉錦;劉煒;王紀明 | 申請（專利權）人： | 中國科學院青島生物能源與過程研究所 |
| 主分類號： | C12N9/10 | 分類號： | C12N9/10;C12N1/21;C12N15/70;C12P5/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 何自剛;王玉松 |
| 地址： | 266101 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 甲基 赤蘚糖 磷酸 胞苷酰 轉移酶 突變體 及其 應用 | ||
1.一種2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶突變體，是2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶氨基酸序列第13位由Pro突變為Ala和/或第20位由Arg突變為Lys。
2.如權利要求1所述突變體，其特征在于，是2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶氨基酸序列第13位由Pro突變為Ala。
3.如權利要求2述突變體，其特征在于，是2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶氨基酸序列第13位由Pro突變為Ala和第20位由Arg突變為Lys。
4.如權利要求1所述突變體，其特征在于，是2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶氨基酸序列第20位由Arg突變為Lys。
5.權利要求1-4所述任一2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
6.一種發酵生產異戊二烯的方法，其特征在于，步驟如下：
1）將權利要求1-4所述任一2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶突變體連接原核表達載體；
2）將步驟1）得到的表達載體導入大腸桿菌感受態細胞與大腸桿菌已有的MEP途徑相整合；
3）利用導入該2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶突變體的重組大腸桿菌發酵合成異戊二烯。
7.如權利要求6所述方法，其特征在于，大腸桿菌為大腸桿菌BL21(DE3)。
8.如權利要求6所述方法，其特征在于，步驟如下：
1）將2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶突變體連接原核表達載體，所述突變體為SEQ?ID?NO.1所示氨基酸序列第13位由Pro突變為Ala或第13位由Pro突變為Ala同時第20位由Arg突變為Lys；
2）將步驟1）得到的表達載體導入大腸桿菌感受態細胞與大腸桿菌已有的MEP途徑相整合；
3）利用導入該2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶突變體的重組大腸桿菌發酵合成異戊二烯。
9.如權利要求6所述方法，其特征在于，步驟如下：
1）將2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶突變體連接原核表達載體，所述突變體為SEQ?ID?NO.1所示氨基酸序列第20位由Arg突變為Lys；
2）將步驟1）得到的表達載體導入大腸桿菌感受態細胞與大腸桿菌已有的MEP途徑相整合；
3）利用導入該2-甲基赤蘚糖醇4-磷酸胞苷酰轉移酶突變體的重組大腸桿菌發酵合成異戊二烯。
10.如權利要求6-9所述任一方法，其特征在于，含有突變體的表達載體導入大腸桿菌感受態細胞與大腸桿菌已有的MEP途徑相整合具體方法為：采用堿裂解法含有突變體的重組質粒，轉化攜帶有pYJM8質粒的大腸桿菌BL21(DE3)感受態細胞，得到重組工程菌BL21/pET-ispD&pYJM8。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中國科學院青島生物能源與過程研究所，未經中國科學院青島生物能源與過程研究所許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201310473741.7/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：調節閥外框生產線用液壓系統
- 下一篇：晾衣繩
