[發明專利]表達IBV S1和N雙抗原蛋白重組質粒及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 201310470341.0
• 申請日: 2013-10-10
• 公開（公告）號: CN103627718A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發明（設計）人: 韋平;李孟;何坤
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;C12N15/66;A61K48/00;A61P31/14
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 楊立華

1.一種表達IBV的S1和N雙抗原蛋白重組質粒，其特征在于主要由雞傳染性支氣管炎病毒的S1、N基因、雞的Ub基因和真核表達載體pVAX1組成。

2.根據權利要求1所述的表達IBV?S1和N雙抗原蛋白重組質粒，其特征在于：所述Ub基因通過一段編碼（G₃S）₄多肽的linker與將雞的Ub基因與S1和N基因連接。

3.根據權利要求2所述的表達IBV的S1和N雙抗原蛋白重組質粒，其特征在于具有序列表SEQ.ID.No.1的堿基序列。

4.根據權利要求3所述的表達IBV的S1和N雙抗原蛋白重組質粒，其特征在于：所述雞傳染性支氣管炎病毒來自中國分離株GX-YL5株。

5.根據權利要求1所述表達IBV的S1和N雙抗原蛋白重組質粒的構建方法，其特征在于用PCR方法擴增雞傳染性支氣管炎病毒的S1、N和雞的Ub基因，將雞的Ub基因與雞傳染性支氣管炎病毒的S1和N基因通過引入一段編碼（G₃S）₄多肽的linker采用酶切位點相連的方法連接并將PCR產物經HindIII和XhoI雙酶切定向插入以HindIII和XhoI雙酶切處理的真核表達載體pVAX1中，即得Ub介導的雞傳染性支氣管炎病毒的S1和N基因真核表達質粒pVAX1-Ub-linker-N-S1。

6.權利要求1所述表達IBV的S1和N雙抗原蛋白重組質粒在制備預防雞傳染性支氣管炎DNA疫苗方面的應用。