[發明專利]一種植物乳桿菌、其細菌素以及培養與分離純化方法

有效

• 申請號: 201310470098.2
• 申請日: 2013-10-10
• 公開（公告）號: CN103667106A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 陸兆新;胡美忠;呂鳳霞;別小妹;張充;趙海珍
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P21/02;C07K7/06;C07K14/335;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/20;C07K1/16;A23L3/3526;A61K38/08;A61K38/16;A61P31/00;C12R1/25
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌

技術領域

本發明涉及一種植物乳桿菌及其細菌素，特別涉及一種植物乳桿菌、其細菌素以及培養與分離純化方法。?

背景技術

在食品工業中，有關食品的防腐保鮮始終是一個亟待解決的重要問題。據FDA統計，全世界每年約有10%-20%的食品損失于各種腐敗變質，在食品腐敗變質的過程中，微生物起著決定性的作用。針對食品腐敗變質的原因，采取不同的處理手段控制食品中的微生物，但是有些殺菌方法會對食品的質地、風味和營養產生不良影響。食品防腐劑因其使用方便有效，同時能很好地保存食品的商品價值，目前仍然是食品防腐的重要措施之一。?

乳酸菌及發酵產物人類已經有數千年的使用歷史，現在不僅應用在食品制造，而且還應用在治病、保健方面。數千年的利用歷史及無毒副作用的優良品質使乳酸菌被認為是GRAS（generally?recognized?as?safe公認安全）菌。其發酵產物被視為GRAS物質。其中某些種類的乳酸菌在代謝過程中會由核糖體合成小分子多肽----細菌素，部分細菌素能抑制病原微生物、腐敗性細菌的生長繁殖，具有防腐應用前景。目前，國內外研究最深、最透徹的乳酸鏈球菌素--Nisin，已在80多個國家和地區得到廣泛應用（也是唯一一種得到商業化應用批準）。我國也于1992年將Nisin列入1992年10月1日實施的國標GB2660-86中的增補品種，可用于罐頭食品、植物蛋白飲料、乳制品和肉制品的保藏中。然而，Nisin在堿性環境下活性較低；只對格蘭陽性菌有作用，對格蘭陰性致病菌、酵母、霉菌、病毒無抑制作用；活性受生物酶影響較大等限制了它的使用。因而繼續篩選新的高效廣譜乳酸菌細菌素成為近年來全世界范圍內科學家的一個熱門研究方向。?

目前我國食品添加劑標準（GB2760）允許使用的32種防腐劑中以化學防腐劑為主，天然防腐劑僅乳鏈菌肽（Nisin）和納他霉素（Natamycin）兩種。化學防腐劑通常成本較低、化學性能穩定以及抑菌譜較廣、防腐效果好，但目前研究已表明，化學防腐劑對人體不同程度存在一定的毒性，其中一些具有誘癌性和致畸性，在超標使用的情況下易引起食物中毒。?

隨著人民生活水平的提高和食品安全意識的增強，人們對食品的安全衛生和自身健康狀況日益關注，不含化學防腐劑的天然食品和綠色食品更容易被消費者認可和接受。因此，研究開發高效安全無毒的天然防腐劑已成為當今國際食品添加劑發展的主要方向。?

我國允許使用的抗菌物質Nisin和Natamycin均為微生物源天然防腐劑。Nisin是乳酸鏈球菌合成的短肽分子，對革蘭氏陽性菌，特別是對肉毒梭狀芽孢桿菌及其孢子，嗜熱脂肪芽孢及其孢子、金黃色葡萄球菌、李斯特菌等具有顯著拮抗活性。Nisin是目前公認安全和應用范圍最廣的天然食品防腐劑，但也存在某些局限性，其抑菌譜較窄，僅對革蘭氏陽性菌表現出顯著抑制作用，對革蘭氏陰性菌和真菌沒有活性，在中性和堿性條件下對熱不穩定，從而使其在食品中的應用受到一定限制。Natamycin源于放線菌納塔爾霉菌（Streptomyces?natalensis），為多烯烴大環內酯類真菌抑制劑，能有效抑制霉菌、酵母菌和絲狀真菌，但對細菌和病毒無效。?

雖然國內外對不同來源的微生物天然防腐劑如乳酸菌細菌素、抗菌肽研究較多，但是在食品工業中實際應用很少，這主要是因為其中一些天然防腐劑抑菌譜窄，抑菌效果不夠理想，抗菌性能不穩定，尤其是價格偏高、產率低且安全性未能得以確定，目前還很難取代化學防腐劑的作用和地位。因此，開發出廣譜、高效、穩定、安全、產率高、低成本的天然食品防腐劑具有潛在應用價值和巨大的市場需求。?

發明內容

本發明的目的在于為了克服以上現有技術的不足而提供一種植物乳桿菌、其細菌素以及培養與分離純化方法。?

本發明是由以下技術手段實現的：?

一種植物乳桿菌（Lactobacillus?plantarum）163，菌種保藏號為CGMCC?NO.8224。

上述植物乳桿菌（Lactobacillus?plantarum）163，已于2013年9月20日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵政編碼100101），保藏登記號為CGMCC?NO.8224。

一種細菌素，以上所述的植物乳桿菌（Lactobacillus?plantarum）163發酵得到。?

所述的細菌素，可以具有SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列。?