[發(fā)明專利]檢測PGRMC1的試劑在制備腎癌診斷試劑、試劑盒中的用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310460771.4
• 申請日: 2013-09-30
• 公開（公告）號: CN103543266A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發(fā)明（設計）人: 梁淑芳;陳冰;楊寒朔
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;C12Q1/02
• 代理公司: 成都虹橋專利事務所(普通合伙) 51124
• 代理人: 梁鑫

技術領域

本發(fā)明屬于腫瘤分子生物學領域，具體涉及一種腎癌診斷試劑、試劑盒及防治藥物。?

背景技術

腎癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，占所有惡性腫瘤的2-3%，約占腎臟腫瘤的90%，其發(fā)病率占泌尿系腫瘤的第二位。腎癌起源于腎小管上皮細胞，大約75%為腎透明細胞癌。近幾十年來腎癌的發(fā)病率和死亡率均有增高的趨勢，發(fā)病率以每年2%的速度增長。由于缺乏有效的早期診斷標志物，阻礙了對腎癌的及時診斷，50%腎癌患者在確診時已為晚期，約四分之一的腎癌患者在發(fā)現(xiàn)時已發(fā)生轉移，預后較差。?

目前腎癌的治療仍以根治性手術為主，但因腎癌具有放化療抵抗性，術后約有20-40%的患者出現(xiàn)復發(fā)。因此，腎癌的早期篩查與早期診斷對于腎癌的防治非常重要，并且發(fā)展有效監(jiān)控腎癌的復發(fā)轉移試劑、試劑盒以及研發(fā)新的腎癌靶向治療藥物是急需解決的重要課題和國民健康的重大需求。?

PGRMC1,即孕酮受體膜組分1(PGRMC1)是一個28kD,由195個氨基酸組成的蛋白（SEQ?ID?No.1:MAAEDVVATG?ADPSDLESGG?LLHEIFTSPL?NLLLLGLCIF?LLYKIVRGDQ?PAASGDSDDD?EPPPLPRLKR?RDFTPAELRR?FDGVQDPRIL?MAINGKVFDV?TKGRKFYGPE?GPYGVFAGRD?ASRGLATFCL?DKEALKDEYD?DLSDLTAAQQ?ETLSDWESQF?TFKYHHVGKL?LKEGEEPTVY?SDEEEPKDES?ARKND，http://www.uniprot.org/uniprot/O00264），屬于膜相關孕酮受體蛋白家族，近來研究顯示PGRMC1蛋白在癌癥中發(fā)揮重要作用【1,2】。PGRMC1蛋白通常在乳腺，結腸和甲狀腺腫瘤組織及結腸，甲狀腺，卵巢，肺和宮頸癌起源的細胞中過表達【3,4】。微陣列分析已經(jīng)檢測到PGRMC1蛋白在結腸、肺、卵巢和乳腺腫瘤中的表達【5-7】。蛋白質組學的分析表明乳腺癌中PGRMC1蛋白增加，PGRMC1蛋白是雌激素受體的新的分子標志物【8,9】。此外，PGRMC1蛋白還調節(jié)癌細胞對化療的敏感性【10】。到目前為止，未見PGRMC1和腎癌關系的報道。未見通過檢測PGRMC1表達水平及磷酸化水平來實現(xiàn)腎癌的診斷試劑及試劑盒的相關報道，也未見通過降低其表達水平或抑制其磷酸化水平來達到治療腎癌的目的的報道。?

本領域目前需要提供新的腎癌的診斷尤其是早期診斷、藥物療效監(jiān)測的檢測產(chǎn)品以及防治藥物。?

發(fā)明內容

本發(fā)明所要解決的第一個技術問題是提供一種腎癌診斷試劑。該診斷試劑含有可檢測孕酮受體膜組分1蛋白表達水平和/或磷酸化水平的試劑。?

其中，上述的檢測孕酮受體膜組分1蛋白表達水平和/或磷酸化水平的試劑包括孕酮受體膜組分1的多克隆抗體或單克隆抗體。?

其中，上述的檢測孕酮受體膜組分1蛋白表達水平和/或磷酸化水平的試劑包括能特異擴增孕酮受體膜組分1基因mRNA的PCR引物。?

本發(fā)明解決的第二個問題是提供了一種腎癌檢測試劑盒或生物芯片。該腎癌檢測試劑盒或生物芯片含有上述的腎癌診斷試劑。?

同時也提供了上述檢測孕酮受體膜組分1蛋白表達水平和/或磷酸化水平的試劑在制備腎癌診斷試劑中的用途。進一步也提供了上述檢測孕酮受體膜組分1蛋白表達水平和/或磷酸化水平的試劑在制備腎癌檢測試劑盒或生物芯片?

本發(fā)明解決的第三個問題是提供了一種治療腎癌的藥物。該治療腎癌的藥物為能減少改變孕酮受體膜組分1的蛋白表達水平和/或磷酸化水平或其編碼基因轉錄的mRNA含量的藥物。?

其中，上述的藥物為孕酮受體膜組分1的shRNA分子或能表達可檢測孕酮受體膜組分1的shRNA分子的表達載體。?

其中，上述的藥物為孕酮受體膜組分1的拮抗劑或多克隆抗體或單克隆抗體。?

本發(fā)明還提供了篩選上述的藥物的方法。該方法包括以下步驟：?

a、建立腎癌的細胞模型或動物模型的模型組，并設立正常對照組；?

b、用待篩選藥物按劑量梯度作用于模型組，然后檢測其中可檢測孕酮受體膜組分1蛋白的蛋白表達水平或其基因的mRNA含量；?

c、將檢測結果與正常對照組進行比較，能使模型組中可檢測孕酮受體膜組分1蛋白的蛋白表達水平或其基因的mRNA含量顯著趨近正常對照組的待篩選藥物即被篩中。?