[發明專利]檢測IDH1、IDH2基因多態突變位點的引物、方法和試劑盒

在審

• 申請號: 201310459219.3
• 申請日: 2013-09-30
• 公開（公告）號: CN103451314A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 周曉犢;王淑一
• 申請（專利權）人: 南京艾迪康醫學檢驗所有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 杭州裕陽專利事務所(普通合伙) 33221
• 代理人: 應圣義

1.檢測IDH1、IDH2基因多態熱點突變情況的引物，其特征在于，包括：

(ⅰ)?擴增IDH1基因的引物，其堿基序列為：

IDH1-132-F：?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R：?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

?(ⅱ)?擴增IDH2基因的引物，其堿基序列為：

?????IDH2-140/172-F：?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R：?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

2.如權利要求1所述的引物，其特征在于，還包括測序引物，其堿基序列為：

(ⅰ)?檢測IDH1基因的測序引物堿基序列為：

IDH1-132-F：?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R：?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

?(ⅱ)?檢測IDH2基因的測序序列的引物堿基序列為：

?????IDH2-140/172-F：?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R：?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

3.如權利要求1所述的引物，其特征在于，引物序列IDH1-132-F和IDH1-132-R是擴增IDH1基因包含第132位氨基酸序列的引物。

4.如權利要求1所述的引物，其特征在于，引物序列IDH2-140/172-F和IDH2-140/172-R是擴增擴增IDH2基因包含第140、第172位氨基酸序列的引物。

5.檢測IDH1、IDH2基因多態熱點突變情況的方法，包括以下步驟：

抽提血液中的組織DNA；

用PCR擴增步驟1中提取的DNA；

對步驟2中的擴增產物進行測序；

對測序結果進行判斷，確定IDH1、IDH2基因是否發生突變；

其中PCR擴增引物為：

(ⅰ)?擴增IDH1基因的引物，其堿基序列為：

IDH1-132-F：?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R：?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

?(ⅱ)?擴增IDH2基因的引物，其堿基序列為：

?????IDH2-140/172-F：?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R：?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，測序引物堿基序列為：

(ⅰ)?檢測IDH1基因的測序引物堿基序列為：

IDH1-132-F：?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R：?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

?(ⅱ)?檢測IDH2基因的測序序列的引物堿基序列為：

?????IDH2-140/172-F：?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R：?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

7.一種檢測IDH1、IDH2基因多態突變位點的試劑盒，包括

(i)?組織DNA抽提試劑；

(ii)?檢測體系PCR擴增反應液；

(iii)?測序體系試劑；

(iv)陽性對照品和陰性對照品；

其中PCR擴增反應液引物為：

(ⅰ)?擴增IDH1基因的引物，其堿基序列為：

IDH1-132-F：?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R：?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

?(ⅱ)?擴增IDH2基因的引物，其堿基序列為：

?????IDH2-140/172-F：?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R：?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。