[發(fā)明專利]檢測(cè)IDH1、IDH2基因多態(tài)突變位點(diǎn)的引物、方法和試劑盒在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310459219.3 | 申請(qǐng)日: | 2013-09-30 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN103451314A | 公開(kāi)(公告)日: | 2013-12-18 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 周曉犢;王淑一 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 南京艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12Q1/68 | 分類號(hào): | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 杭州裕陽(yáng)專利事務(wù)所(普通合伙) 33221 | 代理人: | 應(yīng)圣義 |
| 地址: | 211100 江蘇省南京市江寧*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 檢測(cè) idh1 idh2 基因 突變 引物 方法 試劑盒 | ||
1.檢測(cè)IDH1、IDH2基因多態(tài)熱點(diǎn)突變情況的引物,其特征在于,包括:
(ⅰ)?擴(kuò)增IDH1基因的引物,其堿基序列為:
IDH1-132-F:?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R:?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
?(ⅱ)?擴(kuò)增IDH2基因的引物,其堿基序列為:
?????IDH2-140/172-F:?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R:?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
2.如權(quán)利要求1所述的引物,其特征在于,還包括測(cè)序引物,其堿基序列為:
(ⅰ)?檢測(cè)IDH1基因的測(cè)序引物堿基序列為:
IDH1-132-F:?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R:?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
?(ⅱ)?檢測(cè)IDH2基因的測(cè)序序列的引物堿基序列為:
?????IDH2-140/172-F:?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R:?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
3.如權(quán)利要求1所述的引物,其特征在于,引物序列IDH1-132-F和IDH1-132-R是擴(kuò)增IDH1基因包含第132位氨基酸序列的引物。
4.如權(quán)利要求1所述的引物,其特征在于,引物序列IDH2-140/172-F和IDH2-140/172-R是擴(kuò)增擴(kuò)增IDH2基因包含第140、第172位氨基酸序列的引物。
5.檢測(cè)IDH1、IDH2基因多態(tài)熱點(diǎn)突變情況的方法,包括以下步驟:
抽提血液中的組織DNA;
用PCR擴(kuò)增步驟1中提取的DNA;
對(duì)步驟2中的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序;
對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行判斷,確定IDH1、IDH2基因是否發(fā)生突變;
其中PCR擴(kuò)增引物為:
(ⅰ)?擴(kuò)增IDH1基因的引物,其堿基序列為:
IDH1-132-F:?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R:?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
?(ⅱ)?擴(kuò)增IDH2基因的引物,其堿基序列為:
?????IDH2-140/172-F:?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R:?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
6.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,測(cè)序引物堿基序列為:
(ⅰ)?檢測(cè)IDH1基因的測(cè)序引物堿基序列為:
IDH1-132-F:?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R:?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
?(ⅱ)?檢測(cè)IDH2基因的測(cè)序序列的引物堿基序列為:
?????IDH2-140/172-F:?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R:?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
7.一種檢測(cè)IDH1、IDH2基因多態(tài)突變位點(diǎn)的試劑盒,包括
(i)?組織DNA抽提試劑;
(ii)?檢測(cè)體系PCR擴(kuò)增反應(yīng)液;
(iii)?測(cè)序體系試劑;
(iv)陽(yáng)性對(duì)照品和陰性對(duì)照品;
其中PCR擴(kuò)增反應(yīng)液引物為:
(ⅰ)?擴(kuò)增IDH1基因的引物,其堿基序列為:
IDH1-132-F:?GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R:?GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
?(ⅱ)?擴(kuò)增IDH2基因的引物,其堿基序列為:
?????IDH2-140/172-F:?CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R:?CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
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