[發明專利]一種植物小RNA的快速提取方法有效
| 申請號： | 201310454607.2 | 申請日： | 2013-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN103484451A | 公開（公告）日： | 2014-01-01 |
| 發明（設計）人： | 王靜毅;馮仁軍;柴娟;馬子龍;武耀廷 | 申請（專利權）人： | 中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 海口翔翔專利事務有限公司 46001 | 代理人： | 莫臻 |
| 地址： | 571101 海*** | 國省代碼： | 海南;66 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 植物 rna 快速 提取 方法 | ||
1.一種植物小RNA的快速提取方法，其特征在于，其步驟如下：
1）取植物組織在液氮中迅速研碎后與CTAB提取液混勻，加入量為每毫升CTAB提取液加入0.2g植物組織，65℃水浴10～60分鐘；
2）離心，取上清，用2倍上清液體積的水飽和酚/氯仿混合試劑抽提至無中間相；
3）離心，取上清，加入2倍上清液體積的無水乙醇和1／10上清液體積的pH值為5.2、濃度為3mol／L的醋酸鈉溶液，降溫至0℃，保持0℃并放置10分鐘以上；
4）離心，棄上清，沉淀物用300μl濃度為4mol／L的異硫氰酸胍溶液和100μl?pH值為4.0、濃度為2mol／L的醋酸鈉溶液重懸，加入1倍上清液體積的水飽和酚/氯仿混合試劑抽提至無中間相；
5）離心，取上清，加入2倍上清液體積的無水乙醇和1／10上清液體積的pH值為5.2、濃度為3mol／L的醋酸鈉溶液，降溫至0℃，保持0℃并放置10分鐘以上；
6）離心，棄上清，沉淀物用400μl?DEPC水溶解，加入50μl50%PEG8000和50μl5mol／L氯化鈉溶液，降溫至0℃，保持0℃并放置30分鐘以上；
7）離心，取上清，加入2.5倍上清液體積的無水乙醇和1/10上清液體積的pH值為5.2、濃度為3mol／L的醋酸鈉溶液，－70℃放置30分鐘以上；
8）離心，沉淀物以75%乙醇洗滌2～3次，風干后用DEPC水溶解，備用；
所述水飽和酚與氯仿組成的混合試劑中水飽和酚與氯仿的體積比為1︰1。
2.根據權利要求1所述的植物小RNA的快速提取方法，其特征在于：所述植物是指富含多糖多酚的植物。
3.根據權利要求1所述的植物小RNA的快速提取方法，其特征在于：所述的離心條件為轉速8000～13000rpm，時間5～20分鐘。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所，未經中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201310454607.2/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：用于家用電器的機械連接裝置以及家用電器組合
- 下一篇：一種牙刷
