[發(fā)明專利]酪蛋白磷酸肽鋅螯合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310452264.6
• 申請日: 2013-09-29
• 公開（公告）號: CN103494214A
• 公開（公告）日: 2014-01-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王志耕;張胥卿;梅林;薛秀恒
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: A23L1/30
• 分類號: A23L1/30;A23K1/16;A23C9/152;A23C11/10;A21D2/24
• 代理公司: 合肥金安專利事務(wù)所 34114
• 代理人: 金惠貞

技術(shù)領(lǐng)域

?本發(fā)明屬于功能性營養(yǎng)強化劑的制備工藝技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種制備酪蛋白磷酸肽鋅螯合物的工藝方法。

背景技術(shù)

鋅作為人體必需的微量元素之一，是具有重要生理功能的營養(yǎng)元素，在機體新陳代謝中具有重要作用，與生長發(fā)育、生殖、消化、免疫、視覺、衰老等生理功能都有極密切的關(guān)系。兒童營養(yǎng)狀況調(diào)查結(jié)果表明，我國約有26%～27%?的兒童缺鋅，有些地區(qū)成年人及老年人也有缺鋅癥狀。兒童缺鋅會影響其智力發(fā)展及生長發(fā)育，成人及老年人缺鋅則影響正常代謝，從而導致免疫力降低，引發(fā)多種疾病。因此，通過營養(yǎng)強化劑或者膳食補鋅具有重要意義。我國經(jīng)全國食品添加劑標準化技術(shù)委員會審定、衛(wèi)生部公布列入使用衛(wèi)生標準的鋅營養(yǎng)強化劑有:氯化鋅、硫酸鋅、氧化鋅、葡萄糖酶鋅、乳酸鋅、乙酸鋅(醋酸鋅)?、檸檬酸鋅(枸櫞酸鋅)和甘氨酸鋅。其中，無機鋅3種，有機鋅5種。主要應(yīng)用于乳制品、嬰幼兒食品、飲液及乳飲料、谷類及其制品、食鹽等食品中。目前補鋅制劑的研發(fā)已經(jīng)歷了四代：最早使用的補鋅劑為無機鋅，如硫酸鋅、氯化鋅、氧化鋅等,這類鋅劑對腸胃有刺激性，生物學效價低,因此使用逐步減少。第二代為有機鋅，如葡萄糖酸鋅、醋酸鋅、乳酸鋅、檸檬酸鋅(枸櫞酸鋅)等。因這類鋅強化劑在口味、利用率和被人體的吸收性等方面有較大的改善,而被廣泛應(yīng)用。第三代氨基酸螯合鋅，它具有良好的生物化學穩(wěn)定性，易為動物體所吸收，其生物學效價明顯優(yōu)于有機鋅。第四代為生物活性鋅，這一類補鋅劑多籍助肽的生物活性功能，可進一步提高鋅的吸收率和生物學效價，是新型補鋅劑的研究開發(fā)重點。如高素蘊等（2003）研究了大豆分離蛋白水解物中分子量小于10?kDa?的混合肽制備螯合鋅的方法。邱冬玲等（2008）研究了以絲素蛋白水解物中的多肽為原料與鋅離子合成制備多肽鋅螯合物的方法。劉成梅等（2008）研究了以羅非魚皮膠原多肽(TSP-I)為配位體，采用水合體系法與硫酸鋅螯合，制備可用于補鋅劑的多肽螯合鋅技術(shù)。

?酪蛋白磷酸肽(CaseinPhosphopep-tides，CPPs)是以牛乳酪蛋白為原料，經(jīng)單一酶或復合酶系水解，再經(jīng)分離純化而得到的一類含有磷酸絲氨酸簇的天然生理活性短肽。研究表明：CPPs是一種良好的金屬結(jié)合肽，在動物小腸環(huán)境中能與鈣、鐵、鋅二價礦物質(zhì)離子結(jié)合，防止產(chǎn)生磷酸鹽沉淀，增強腸內(nèi)可溶性礦物質(zhì)的濃度，從而促進吸收利用。如Matsui等(1994)在低鈣日糧中添加0.5％CPPs，大鼠堿性磷酸酶活性高于對照組，說明CPPs能夠提高鋅的利用率。Hansen等(1997)和Ashida等(1996)實驗表明CPPs具有促進動物對Ca、Zn、Fe吸收的功能。目前，國內(nèi)外僅有酪蛋白磷酸肽制備方面的文獻報道，如Reynolds?Eric等（2001）報道了一種生產(chǎn)酪蛋白磷酸肽的方法，在蛋白酶水解酪蛋白后的溶液中加入氯化鈣，使酪蛋白磷酸肽聚集，再通過過濾器分離出酪蛋白磷酸肽。曹庸（2010）等報道了用胰蛋白酶酶解干酪素，再采用超濾膜分離，得到酪蛋白磷酸肽溶液的一種酪蛋白磷酸肽的制備工藝。而酪蛋白磷酸肽與鋅螯合制備酪蛋白磷酸肽鋅的技術(shù)尚未見專利和文獻報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在提供一種酪蛋白磷酸肽鋅螯合物，一種酪蛋白磷酸肽鋅螯合物為固態(tài)的白色粉末，無味，微溶于水，易溶于弱酸性水中，不溶于醇等有機溶劑；酪蛋白磷酸肽鋅螯合物中酪蛋白磷酸肽與鋅的螯合率達到90%以上。

制備酪蛋白磷酸肽鋅螯合物的方法是通過酶解酪蛋白獲得的酪蛋白磷酸肽與無機鋅進行螯合反應(yīng)，制得酪蛋白磷酸肽鋅螯合物。

制備酪蛋白磷酸肽鋅螯合物的具體操作步驟如下：

（1）取17.5g酪蛋白，溶于溫度60℃～70℃的50ml濃度0.25mol/L的氫氧化鈉溶液中，完全溶解，用去離子水定容至250g，配成濃度7%的酪蛋白溶液；

（2）在酪蛋白溶液中加入堿性蛋白酶0.07g，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至10.0～10.5，在溫度55℃～60℃條件下保溫酶解3.0h，置于溫度100℃沸水浴處理8min～10min滅酶活，得到酶解液；????

（3）用鹽酸調(diào)節(jié)酶解液的pH值至4.6，在轉(zhuǎn)速3500r/min條件下離心15min，取上清液，即為酪蛋白酶解液；

?（4）在酪蛋白酶解液中加入濃度10%的氯化鈣溶液，使酪蛋白酶解液中氯化鈣的含量為1.0%?，靜置1.0h，加入與酪蛋白酶解液等體積量的濃度95%的乙醇,?在轉(zhuǎn)速8000r/min條件下離心15min?，收集沉淀物，即得到酪蛋白磷酸肽；