[發(fā)明專利]具有抑制呼吸道病毒感染的活性的肽及其應(yīng)用和制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310451941.2
• 申請(qǐng)日: 2013-09-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103554244A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭伯建;趙旵軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 香雪集團(tuán)(香港)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47;A61K38/17;A61P31/14;A61P31/16;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/70;C12Q1/02;C12R1/93
• 代理公司: 北京天昊聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11112
• 代理人: 丁業(yè)平;金小芳

1.一種通過(guò)化學(xué)途徑或基因工程合成的肽，其特征在于，所述肽具有能夠與呼吸道病毒的表面糖蛋白結(jié)合的功能性結(jié)構(gòu)域，并且所述肽具有抑制呼吸道病毒感染的活性。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽，還具有能夠抑制細(xì)胞晚期內(nèi)體酸化的功能。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽，其中所述肽具有5個(gè)或更多個(gè)堿性氨基酸；優(yōu)選地，在所述肽的N端或C端具有2個(gè)或更多個(gè)堿性氨基酸；更優(yōu)選地，在所述肽的N端或C端具有3個(gè)或更多個(gè)堿性氨基酸。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的肽，其中所述的肽具有4個(gè)或更多個(gè)半胱氨酸。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的肽，其具有以下（a）或（b）所述的氨基酸序列：

（a）具有序列表SEQ?ID?NO:10所示的氨基酸序列；或

（b）具有在（a）所述氨基酸序列中替換、刪除、和/或添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸而得到的氨基酸序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的肽，其中所述的（b）具有與（a）所述氨基酸序列至少70%、優(yōu)選至少80%、更優(yōu)選至少90%的一致性。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的肽，其氨基酸序列如序列表SEQ?IDNO:10所示、如序列表SEQ?ID?NO:13所示或者如序列表SEQ?ID?NO:17所示。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的肽，其中所述N端包括自該肽的N末端氨基酸起10個(gè)氨基酸以內(nèi)的區(qū)段；所述C端包括自該肽的C末端氨基酸起倒數(shù)10個(gè)氨基酸以內(nèi)的區(qū)段。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的肽，其中所述C端具有兩個(gè)半胱氨酸并具有所述堿性氨基酸。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的肽，其中所述C端具有10個(gè)氨基酸并具有如下氨基酸組成：

堿性氨基酸-中性氨基酸-堿性氨基酸-中性氨基酸-堿性氨基酸-半胱氨酸-半胱氨酸-堿性氨基酸-中性氨基酸-堿性氨基酸-自由羧基。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽，其中所述肽源自人或小鼠；更優(yōu)選地，所述肽源自小鼠β-防衛(wèi)素-4。

12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽，其中所述呼吸道病毒選自流感病毒和冠狀病毒；所述流感病毒包括流感病毒H1、H3、H5和H7亞型，所述冠狀病毒包括SARS-CoV和MERS-CoV。

13.一種組合物，其包含：

根據(jù)權(quán)利要求1-12中任意一項(xiàng)所述的肽；以及可藥用的輔料。

14.一種阻斷呼吸道病毒感染靶細(xì)胞的方法，所述方法包括：

在含有所述靶細(xì)胞和所述呼吸道病毒的體系中，將根據(jù)權(quán)利要求1-12中任意一項(xiàng)所述的肽與所述病毒接觸并與所述病毒結(jié)合；

所述的肽抑制病毒RNA從所述靶細(xì)胞的晚期內(nèi)體中釋放，從而阻斷呼吸道病毒感染該靶細(xì)胞；

所述呼吸道病毒選自流感病毒和冠狀病毒；所述流感病毒包括流感病毒H1、H3、H5和H7亞型，所述冠狀病毒包括SARS-CoV和MERS-CoV。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述的肽與所述病毒的結(jié)合包括所述的肽與所述病毒的表面糖蛋白的結(jié)合；并且所述的肽通過(guò)抑制所述晚期內(nèi)體中的pH值的降低來(lái)抑制所述病毒RNA的釋放。

16.根據(jù)權(quán)利要求1-12中任意一項(xiàng)所述的肽在制備用于預(yù)防或治療呼吸道病毒感染的藥物中的用途。

17.一種制備根據(jù)權(quán)利要求1-12中任意一項(xiàng)所述的肽的方法，包括：通過(guò)化學(xué)途徑或基因工程來(lái)合成所述的肽。

18.一種分離的、編碼根據(jù)權(quán)利要求1-12中任意一項(xiàng)所述的肽的DNA。

19.一種表達(dá)載體，其含有與啟動(dòng)子有效連接的根據(jù)權(quán)利要求18所述的DNA。

20.一種宿主細(xì)胞，其含有權(quán)利要求19所述的表達(dá)載體。

21.一種用于篩選能夠抑制呼吸道病毒感染的肽的試劑盒，包括：陽(yáng)性對(duì)照，該陽(yáng)性對(duì)照為根據(jù)權(quán)利要求1-12中任意一項(xiàng)所述的肽；靶細(xì)胞；以及呼吸道病毒。

22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的試劑盒，還包括細(xì)胞培養(yǎng)基。

23.根據(jù)權(quán)利要求21所述的試劑盒，還包括陰性對(duì)照或空白對(duì)照。