[發明專利]一種檢測人白介素6的電致化學發光免疫傳感器及其制備方法和檢測方法

有效

• 申請號: 201310450342.9
• 申請日: 2013-09-27
• 公開（公告）號: CN103487573A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 毛昌杰;胡曉煒;石陽陽;王程;殷暢;劉蘋貞;張勝義;牛和林;宋吉明
• 申請（專利權）人: 安徽大學
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/53;G01N21/76
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司 34101
• 代理人: 何梅生

技術領域

本發明涉及一種檢測人白介素6的電致化學發光免疫傳感器及其制備方法和檢測方法，更具體地說是涉及一種基于氧化石墨烯納米片/聚苯胺納米線陣列/硒化鎘量子點（GO/PANI/CdSe）復合物的電致化學發光免疫傳感器。

背景技術

自英國科學家在2004年發現石墨烯以來，石墨烯作為一種密集堆積的單層碳原子二維材料已經迅速成為了碳材料研究中的熱點。氧化石墨烯表面存在大量含氧基團，表現出優異的電、熱以及機械性能，在微電子器件、液晶器件以及太陽能電池等領域中有潛在的應用價值[參見：(a)X.S.Li,Y.W.Zhu,W.W.Cai,M.Borysiak,B.Y.Han,D.Chen,R.D.Piner,L.Colombo,R.S.Ruoff,Nano?Letters,2009,9,4359.]。利用聚合物對氧化石墨烯進行功能化修飾，可以大大提高了石墨烯的水溶性和導電性能。在眾多功能化石墨烯中，聚苯胺功能化的氧化石墨烯除具備大的比表面積外，還具有良好的生物相容性和導電性[參見：(b)Y.X.Liu,X.C.Dong,P.Chen,Chem.Soc.Rev.,2012,41,2283.]。

電致化學發光是電極反應產物之間或者電極產物與體系中某組分進行化學反應所產生的一種光輻射，具有成本低，分析范圍廣和高靈敏度等很多優點。自2002年，Bard等在2002年發現了量子點的電致化學發光（ECL）現象以來，ECL免疫傳感器已經引起了人們極大的興趣[參見：(c)Z.F.Ding,B.M.Quinn,S.K.Haram,L.E.Pell,B.A.Korgel,A.J.Bard,Science,2002,296,1293.]。然而與傳統的ECL發光試劑相比，發光效率低和生物相容性差等問題限制了它們在生命分析中的應用。因此，尋找新型高效、價廉、生物相容性好的發光材料仍是構建ECL免疫傳感器的重要研究目標。

人白介素6是一種多效性細胞因子，其在炎癥反應中具有關鍵作用，與一些炎癥性疾病，如牛皮癬、炎癥性關節炎、心血管疾病、發炎性腸道疾病等疾病的發病機制具有密切聯系。傳統的檢測人白介素6的方法是酶聯免疫法。該方法雖然準確，但是它的檢測步驟繁瑣，分析時間長，樣品消耗量大，需要專業的實驗室，且需要昂貴的儀器和專門的底物顯色劑，不利于進行現場檢測。因此，急需發展一種簡單、快速和高靈敏度的分析方法實現人白介素6的快速檢測。

將氧化石墨烯納米片、聚苯胺納米線陣列和硒化鎘量子點的優點結合起來制備氧化石墨烯納米片/聚苯胺納米線陣列/硒化鎘量子點復合物，可以充分發揮三者的優點，能提高電致化學發光性能，良好的生物相容性，較大的比表面積和極好的穩定性，是用于研究ECL免疫傳感器的良好的納米材料，在免疫生物學和臨床診斷等領域將會有廣闊的應用前景。目前，基于氧化石墨烯納米片/聚苯胺納米線陣列/硒化鎘量子點復合物的電致化學發光免疫傳感器還尚無報道。

發明內容

本發明為解決上述現有技術所存在的不足之處，提供一種基于氧化石墨烯納米片/聚苯胺納米線陣列/硒化鎘量子點復合物的檢測人白介素6的電致化學發光免疫傳感器及其制備方法和檢測方法，以期可以以高電致化學發光、高生物相容性的電致化學發光免疫傳感器實現對人白介素6的簡單、快速的檢測。

本發明解決技術問題采用如下技術方案：

本發明檢測人白介素6的電致化學發光免疫傳感器，其結構特點在于：所述免疫傳感器是在玻碳電極的表面覆蓋有氧化石墨烯納米片/聚苯胺納米線陣列/硒化鎘量子點復合物膜，在所述氧化石墨烯納米片/聚苯胺納米線陣列/硒化鎘量子點復合物膜的表面通過1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺處理后固定有人白介素6抗體。

本發明檢測人白介素6的電致化學發光免疫傳感器，其結構特點也在于：所述氧化石墨烯納米片/聚苯胺納米線陣列/硒化鎘量子點復合物膜是以苯胺和氧化石墨烯為原材料，通過原位反應得到氧化石墨烯納米片/聚苯胺納米線陣列復合物，再和硒化鎘量子點混合后獲得。

本發明檢測人白介素6的電致化學發光免疫傳感器的制備方法，其特點在于按如下步驟進行：