[發(fā)明專利]用于治療多發(fā)硬化癥的S1P受體調(diào)節(jié)劑

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310446846.3
• 申請(qǐng)日: 2007-06-25
• 公開（公告）號(hào): CN103550195A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: P·C·希斯坦德;C·施內(nèi)爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 諾瓦提斯公司
• 主分類號(hào): A61K31/137
• 分類號(hào): A61K31/137;A61K31/397;A61P25/00;A61P29/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 張建;黃革生

本申請(qǐng)是中國專利申請(qǐng)200780023601.2的分案申請(qǐng)，原申請(qǐng)的申請(qǐng)日是2007年6月25日，名稱是“用于治療多發(fā)硬化癥的S1P受體調(diào)節(jié)劑”。

本發(fā)明涉及S1P受體調(diào)節(jié)劑在治療或預(yù)防與脫髓鞘疾病、例如多發(fā)硬化癥相關(guān)的新血管生成中的用途。

S1P受體調(diào)節(jié)劑通常為鞘氨醇類似物，例如2-取代的2-氨基-丙烷-1，3-二醇或2-氨基-丙醇衍生物，例如包含式X基團(tuán)的化合物。

鞘氨醇-1-磷酸酯(下文“S1P”)是天然的血清脂。目前有八種已知的S1P受體，即S1P1至S1P8。S1P受體調(diào)節(jié)劑通常為鞘氨醇類似物，例如2-取代的2-氨基-丙烷-1，3-二醇或2-氨基-丙醇衍生物，例如包含式X基團(tuán)的化合物：

其中Z為H、C_1-6烷基、C_2-6鏈烯基、C_2-6炔基、苯基、被OH取代的苯基、被1-3個(gè)取代基取代的C_1-6烷基，所述的取代基選自鹵素、C_3-8環(huán)烷基、苯基和被OH取代的苯基、或CH_2-R_4z，其中R_4z為OH、酰基氧基或式(a)殘基：

其中Z₁為直鍵或O，優(yōu)選O；

R_5z和R_6z各自獨(dú)立地為H或任選被1、2或3個(gè)鹵素原子取代的C_1-4烷基；R_1z為OH、酰基氧基或式(a)殘基；且R_2z和R_3z各自獨(dú)立地為H、C_1-4烷基或酰基。

式X基團(tuán)是作為端基與可以為親水性或疏水性且包含一種或多種脂族、脂環(huán)族、芳族和/或雜環(huán)殘基的部分連接的官能基，其程度為其中Z和R_1z中的至少一個(gè)為或包含式(a)殘基的所得分子作為多種鞘氨醇-1-磷酸酯受體之一的激動(dòng)劑傳導(dǎo)信號(hào)。

S1P受體調(diào)節(jié)劑為作為一種或多種鞘氨醇-1-磷酸受體如S1P1至S1P8的激動(dòng)劑傳導(dǎo)信號(hào)的化合物。例如，與S1P受體結(jié)合的激動(dòng)劑可以導(dǎo)致胞內(nèi)異三聚化G-蛋白解離成Gα-GTP和Gβγ-GTP和/或?qū)е录?dòng)劑占據(jù)的受體的磷酸化增加和下游信號(hào)傳導(dǎo)途徑/激酶的活化。

可以在下列試驗(yàn)中測定S1P受體調(diào)節(jié)劑與單一人S1P受體的結(jié)合親和力：

在人S1P受體S1P₁、S1P₂、S1P₃、S1P₄和S1P₅上測試化合物的S1P受體調(diào)節(jié)劑活性。通過對(duì)化合物誘導(dǎo)的GTP[γ-³⁵S]與膜蛋白的結(jié)合進(jìn)行定量評(píng)價(jià)功能性受體活化，所述膜蛋白由穩(wěn)定表達(dá)適當(dāng)人S1P受體的轉(zhuǎn)染CHO或RH7777細(xì)胞制備。所用的測定技術(shù)為SPA(基于親近閃爍的測定法)。簡言之，連續(xù)稀釋DMSO溶解的化合物，在50mM?Hepes、100mM?NaCl、10mM?MgCl₂、10μM?GDP、0.1％不含脂肪的BSA和0.2nM?GTP[γ-³⁵S](1200Ci/mmol)存在下加入到SPA-珠(Amersham-Pharmacia)固定的表達(dá)膜蛋白的S1P受體中(10-20μg/孔)。于RT在96孔微量滴定板中孵育120分鐘后，通過離心步驟分離未結(jié)合的GTP[γ-³⁵S]。用TOPcount平板讀數(shù)儀(Packard)對(duì)膜結(jié)合GTP[γ-³⁵S]引起的SPA珠發(fā)光進(jìn)行定量。使用標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合軟件計(jì)算EC₅₀。在本測定法中，優(yōu)選S1P受體調(diào)節(jié)劑的與S1P受體的結(jié)合親和力＜50nM。

優(yōu)選的S1P受體調(diào)節(jié)劑例如為除其S1P結(jié)合特性外還具有加速淋巴細(xì)胞歸巢特性的化合物，例如引起由淋巴細(xì)胞由循環(huán)至次級(jí)淋巴組織的再分布、優(yōu)選可逆的再分布導(dǎo)致的淋巴細(xì)胞減少的化合物，不引起全身免疫抑制。分離稚細(xì)胞；刺激來自血液的CD4和CD8T-細(xì)胞和B-細(xì)胞以遷移入淋巴結(jié)(LN)和派爾斑(PP)。

可以在下述血液淋巴細(xì)胞消減試驗(yàn)中測定淋巴細(xì)胞歸巢特性：

通過對(duì)大鼠管飼口服施用S1P受體調(diào)節(jié)劑或載體。在-1天獲得用于血液監(jiān)測的尾血以得到基線個(gè)體值，并在施用后2、6、24、48和72小時(shí)獲得用于血液監(jiān)測的尾血。在本試驗(yàn)中，當(dāng)以例如＜20mg/kg的劑量給藥時(shí)，S1P受體激動(dòng)劑或調(diào)節(jié)劑使外周血液淋巴細(xì)胞消減例如50％。