[發明專利]一種檢測乙肝病毒核酸試劑盒有效
| 申請號: | 201310446194.3 | 申請日: | 2013-09-25 |
| 公開(公告)號: | CN103468829A | 公開(公告)日: | 2013-12-25 |
| 發明(設計)人: | 韓勇軍;劉琪琦;林曉云;李洪強;李洪生 | 申請(專利權)人: | 北京普利耐特生物科技有限公司;中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京瑞思知識產權代理事務所(普通合伙) 11341 | 代理人: | 李濤 |
| 地址: | 100039 北京市大興區經濟技術*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 檢測 乙肝病毒 核酸 試劑盒 | ||
1.一對寡核苷酸探針,其特征在于,熒光探針序列是:5′-FAM-ATCACCACCATCTGGTTTCACCCGGAC-P-3′;淬滅探針序列是:5′-GAAACCAGATGGTGGTGA-Dabcyl-3′。
2.含有權利要求1所述的寡核苷酸探針的檢測試劑。
3.一種檢測乙肝病毒核酸試劑盒,其特征在于,包括含有權利要求1所述的寡核苷酸探針的PCR反應液A。
4.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,上述PCR反應液A還包括用于監測體系的內標探針。
5.根據權利要求4所述的試劑盒,其特征在于,上述內標探針序列是:5′-HEX-TCCATTACACGTGAACGATTCCCCA-TAMRA-3′。
6.根據權利要求3~5任一項所述的試劑盒,其特征在于,上述PCR反應液A還包括含有Mg2+,dATP,dCTP,dGTP,dTTP,dUTP,甲酰胺,Tris-HCl,KCl,Tween-20的PCR反應緩沖液;靶基因正向引物、反向引物;內標的正向引物、反向引物。
7.根據權利要求6所述的試劑盒,其特征在于,所述PCR反應液中的靶基因擴增的引物的是:
正向引物5′-CGTCTCGAGCAACTATACTGT-3′
反向引物5′-CACCGGTCGTGCACAGTATC-3′。
8.根據權利要求6所述的試劑盒,其特征在于,所述監測體系的內標引物是:
正向引物5′-GCCTTTCATTGGCATGACCACCTTTCAT-3′
反向引物5′-AGCCAGTCGTCATAATCGCATT-3′。
9.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,還包括樣本處理液、內標質控品、PCR反應液B、陰性質控品、陽性質控品、定量參考品的其中一種或多種。
10.根據權利要求9所述的試劑盒,其特征在于,所述樣品處理液包括處理液A和處理液B,其中處理液A是7%PEG6000;處理液B包含NaOH,Triton?X-100,NP40,Tris-HCL;PCR反應液B包含Taq酶和UNG酶;陰性質控品是正常血清;陽性質控品是含乙肝病毒核酸的重組DNA片段;定量參考品是含乙肝病毒核酸的重組DNA片段;內標質控品是含熒光素酶的重組DNA片段。
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