[發明專利]一種基于膜技術提取蜜環菌絲體的方法

無效

• 申請號: 201310441259.5
• 申請日: 2013-09-25
• 公開（公告）號: CN103504287A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 袁兵兵;王英燕;張瑞華
• 申請（專利權）人: 江蘇神華藥業有限公司
• 主分類號: A23L1/28
• 分類號: A23L1/28;A01G1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種提取真菌發酵菌絲體的方法，更確切地說是一種基于膜技術提取發酵蜜環菌絲體的新方法。

背景技術

蜜環菌粉（Gastrodia?Tuder?Halimasch?Powder）是白蘑科真菌蜜環菌[Armillaria?mellea(Vahl.ex.Fr.)Quel.]經深層液體發酵培養，經分離提取精制而成干燥菌粉。蜜環菌是一種藥食兼用的真菌，在天然環境下與天麻共生。中國醫學科學院藥物研究所進行了藥理試驗，結果證明蜜環菌發酵物與天麻有類似的藥理作用。（1）鎮靜作用：有加強戊巴比妥鈉閾下催眠劑量的作用，能延長小鼠的睡眠時間，明顯減少小鼠的自由活動；（2）抗驚厥作用：對中樞神經系統興奮藥戊烯四唑有一定的拮抗作用；（3）增強小鼠耐缺氧力的作用；（4）增強機體免疫功能的作用；（5）其他作用：能降低尼古丁引起的小鼠死亡率，對小鼠全腦缺血有腦保護作用，能增加犬的腦血流量和冠狀動脈血流量

與天然天麻相比，蜜環菌粉具有如下幾大特點：1、在化學成分和藥理作用上相類似；2、蜜環菌粉毒性低于天然天麻；3、蜜環菌粉價格遠遠低于天然天麻，且可大量生產?；谏鲜霆毺貎烖c，蜜環菌粉被廣泛應用于制藥、保健品行業。

傳統蜜環分離工藝多采用臥螺離心機進行分離，該方式因受制于離心機分離因子影響，分離過程中菌絲體遭到剪切力破壞，部分有效成分流失到濾液中導致產品質量和收率下降，分離所得濾液較渾濁，里面含有較多的碎菌絲，導致外排濾液COD偏高，該濾液若達到污水排放標準，需要經過復雜的污水處理，污水處理系統工作量太大，給企業帶來了嚴重的經濟負擔。部分企業為了盡可能回收濾液中的殘留菌絲體，對濾液采取濃縮干燥后添加到蜜環菌絲體，由于濾液量大，干燥時間長，不但浪費大量能源，而且對產品質量造成嚴重影響。

發明內容

本發明的目的是為了解決上述蜜環分離提取方法的不足，從而設計了一種基于膜技術分離提取蜜環發酵液的綠色新工藝，該工藝既能提高菌絲體的收率，減少進入濾液的菌絲體，降低濾液的COD，降低污水處理量；又不破壞細胞本身，保證胞內有效成分的全部回收。該發明不但提高了蜜環菌絲體的收率及有效成分，提高了產品質量，增加了經濟效益；又降低了廢水中COD，減輕了污水處理系統壓力，增加了社會效益。

本發明的目的主要按照下述步驟實現的：

一種基于膜技術提取蜜環菌絲體的方法是按照下述工藝步驟進行：

1）取殘糖小于0.5，還原糖低于0.3，發酵液粘度100～150cP的蜜環發酵液通過微濾膜，得到發酵液的微濾透析液和菌絲體，收集得到菌絲體；微濾膜孔徑在0.05～1μm，操作溫度為10～70℃，工作壓力：進壓為2～8bar，出壓為0～5bar；

2）低溫真空烘干：將步驟2）中所得的菌絲體在真空度為-0.065～-0.095Mpa，70～90℃條件下進行干燥，所得干燥物即為蜜環菌絲體。

該方法優選微濾膜孔徑在0.05～0.5μm，操作溫度為50～60℃，工作壓力：進壓為2～4bar，出壓為1～2bar。微濾膜為陶瓷膜或有機膜，其截留分子量為8000－100000Da。

所述的干燥時間為30～35小時，得到的干燥物含水量為3～8%。

該方法所述的發酵液是通過以下方法制備得到的：蜜環菌株活化后制備蜜環種子液，制備好的種子液接種到發酵培養基，接種量5%～8%，發酵培養基組成為葡萄糖2%，黃豆餅粉3%，蔗糖2%，磷酸二氫鉀0.1%，硫酸鎂0.03%，消泡劑0.1%，用水配制，pH值自然，發酵液結束后檢測發酵液濃稠，pH值下降至5.0左右，發酵液結束后得到發酵液pH值下降至4.9～5.1，發酵液殘糖小于0.5，還原糖低于0.3。

本發明所使用的微濾膜可再生，再生用1－2％硝酸和1－2％液堿，將堿洗水和酸洗水中和得到含有無機鹽離子的中性水，該水作為發酵配料用水。

本發明適用于任何蜜環菌菌種，如已寄存于中國農業微生物菌種保藏管理中心的蜜環菌菌種Armillaria，保藏編號ACCC50063等可自由分讓的蟲草頭孢菌菌種均可以使用。

本發明為蜜環分離提取提供了一種新的方法。該方法具有以下幾個突出的優點：

1、提高收率：微濾膜孔徑0.05－1μm，顯著提高了菌絲體得率。