[發(fā)明專利]一種利用酸性蛋白酶水解魚源膠原蛋白制備的抗凍多肽有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310441150.1 | 申請日： | 2013-09-25 |
| 公開（公告）號： | CN103467587A | 公開（公告）日： | 2013-12-25 |
| 發(fā)明（設計）人： | 汪少蕓;蔡茜茜;何慶燕;饒平凡 | 申請（專利權）人： | 福州大學 |
| 主分類號： | C07K14/46 | 分類號： | C07K14/46;C12P21/06;C07K1/20;C07K1/18 |
| 代理公司： | 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡學俊 |
| 地址： | 350108 福建省福州市*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 酸性 蛋白酶 水解 膠原 蛋白 制備 多肽 | ||
【權利要求書】：
1.一種利用酸性蛋白酶水解魚源膠原蛋白制備的抗凍多肽，其特征在于：多肽的氨基酸序列為：GAIGPAGPLGP。
2.一種如權利要求1所述的抗凍多肽的制備方法，其特征在于：以包括來自魚皮、魚鱗的魚源膠原蛋白為原料，采用酸性蛋白酶對其進行酶解，分離純化、冷凍干燥得到抗凍多肽。
3.如權利要求2所述的抗凍多肽的制備方法，其特征在于：所述的酶解條件為：pH為5.4、溫度是37℃、酶解時間為30分鐘、酶-底物配比為1:15（w/w）。
4.如權利要求2所述的抗凍多肽的制備方法，其特征在于：所述的分離純化具體步驟為：酶解產(chǎn)物首先利用Sephadex?G-50凝膠色譜進行分離，洗脫液為去離子水，流速為2mL/min，洗脫峰在225nm下進行測量；收集具有最佳抗凍活性的峰，再用Sulfopropyl-Sepadex?C-25陽離子交換色譜進行分離，洗脫液為NaCl濃度梯度為0-0.5?M的0.01mol/L?pH7.0的磷酸緩沖液，流速為0.5mL/min；收集具有最佳抗凍活性的峰，利用RP-HPLC反相高效液相色譜再進行進一步的分離，反相HPLC的分離條件是用10%-90%?（v/v）乙腈溶液作為洗脫液梯度洗脫，流速為1mL/min，收集20%乙腈和80%水（v/v）處的洗脫峰,得到抗凍多肽。
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