[發明專利]優質肉雞肌苷酸與肌內脂肪含量相關基因聚合的選育方法

有效

• 申請號: 201310436012.4
• 申請日: 2013-09-23
• 公開（公告）號: CN103436630A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 蔣小松;張增榮;杜華銳;邱莫寒;李晴云;楊朝武;李雯;宋小燕;余春林;熊霞
• 申請（專利權）人: 四川省畜牧科學研究院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;A01K67/027
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

技術領域

本發明涉及一種選育方法，特別涉及一種優質肉雞肌苷酸與肌內脂肪含量相關基因聚合的選育方法。

技術背景

改善與提高肉質風味已成為優質肉雞育種研究的重要方向，其中，肌苷酸和肌內脂肪含量是影響肉質風味性狀的重要因素。但肌苷酸和肌內脂肪均受多種因素影響，常規選育進展較慢；因此利用肌苷酸及肌內脂肪性狀的相關候選基因，應用分子標記輔助選擇加快遺傳進展是當前較為有效的手段，從而從遺傳水平上進行雞肉質風味育種改良。國內外對肌肉品質性狀分子標記篩選和標記輔助選擇的研究已具備一定基礎，特別對一些單基因性狀標記輔助選擇已取得了一定的進展。但肉質性狀是一個受多基因控制的綜合性狀，僅僅從單基因入手進行分子輔助育種，往往不能達到全面改良肉品質，最終培育優質雞的目的。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種優質肉雞肌苷酸與肌內脂肪含量相關基因聚合的選育方法，其實現優勢基因型的有利聚合，同時能較全面的探尋雞肉質風味性狀的遺傳機制。

本發明是通過下述技術方案來解決上述技術問題的：一種優質肉雞肌苷酸與肌內脂肪含量相關基因聚合的選育方法，其特征在于，其包括以下步驟：

步驟一，以連續兩個世代優質肉雞基因組DNA為模版，在PCR條件下，利用第一引物、第二引物、第三引物，分別擴增ADSL、GARS-AIRS-GART、A-FABP基因；

步驟二，根據瓊脂糖凝膠電泳對第一引物、第二引物、第三引物擴增產物進行大小判定，然后采用DNA測序技術篩選到腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉甲基酶基因5’非編碼區，以及脂肪細胞脂肪酸結合蛋白基因內含子2共有三個堿基的突變；

步驟三，再利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對這三個位點的SNPs進行基因分型和基因頻率分析，分析優質肉雞個體多態性與肌苷酸與肌內脂肪含量的關系及不同基因型組合與肌苷酸與肌內脂肪含量之間的關系，并上溯親代，跟蹤子代，檢測優質肉雞個體的基因型組合與肌苷酸與肌內脂肪含量的關系，分析不同基因型在肌苷酸與肌內脂肪含量性狀形成中的貢獻，挑選高肌苷酸與肌內脂肪含量個體的基因型組合，分析高肌苷酸與肌內脂肪含量個體基因型組合形成的選配方式，應用這些選配方式形成優質肉雞高肌苷酸與肌內脂肪含量的多基因聚合核心群。

優選地，所述第一引物如下：上游引物1F：5’-TCTCCTTCCACAGGCTCAA-3’；下游引物1R：5’-AACTGCTGCACTGCACGAT-3’；所述第二引物P2如下：上游引物2F：5’-ACAGTTGCCAGTCTGATTA-3’；下游引物2R：5’-CATCGCCAGAGTTAGAAGT-3’；所述第三引物P3如下：上游引物3F：5’-GGAATGTGACAACGCTAA-3’；下游引物3R：5’-CGGATAAGGAGGGCAGAG-3’。

優選地，所述第一引物擴增腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，用于篩選優質肉雞腺苷琥珀酸裂解酶基因位點的突變，第二引物擴增甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉甲基酶基因5’非編碼區，用于篩選優質肉雞甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉甲基酶基因位點的突變，第三引物擴增脂肪細胞脂肪酸結合蛋白基因內含子2，用于篩選優質肉雞脂肪細胞脂肪酸結合蛋白基因位點的突變。

本發明具有如下積極效果：本發明實現優勢基因型的有利聚合，同時能較全面的探尋雞肉質風味性狀的遺傳機制。

具體實施方式

為了使本發明的內容更容易被清楚的理解，下面根據具體實施例，對本發明作進一步詳細的說明。

基因聚合是將分散在不同品種中的有利基因聚合到同一個基因組中，在分離世代中通過分子標記選擇含有多個目標基因的個體，實現有利基因的聚合。采用基因聚合手段可以實現真正意義上的分子育種。故研究多個肉質候選基因的聚合效應將為加快地方雞種優良種質特性的開發與利用，為優質雞的產業發展提供技術支撐。