[發明專利]優質肉雞肌苷酸與肌內脂肪含量相關基因聚合的選育方法

有效

• 申請號: 201310436012.4
• 申請日: 2013-09-23
• 公開（公告）號: CN103436630A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 蔣小松;張增榮;杜華銳;邱莫寒;李晴云;楊朝武;李雯;宋小燕;余春林;熊霞
• 申請（專利權）人: 四川省畜牧科學研究院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;A01K67/027
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

1.一種優質肉雞肌苷酸與肌內脂肪含量相關基因聚合的選育方法，其特征在于，其包括以下步驟：

步驟一，以連續兩個世代優質肉雞基因組DNA為模版，在PCR條件下，利用第一引物、第二引物、第三引物，分別擴增ADSL、GARS-AIRS-GART、A-FABP基因；

步驟二，根據瓊脂糖凝膠電泳對第一引物、第二引物、第三引物擴增產物進行大小判定，然后采用DNA測序技術篩選到腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉甲基酶基因5’非編碼區，以及脂肪細胞脂肪酸結合蛋白基因內含子2共有三個堿基的突變；

步驟三，再利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對這三個位點的SNPs進行基因分型和基因頻率分析，分析優質肉雞個體多態性與肌苷酸與肌內脂肪含量的關系及不同基因型組合與肌苷酸與肌內脂肪含量之間的關系，并上溯親代，跟蹤子代，檢測優質肉雞個體的基因型組合與肌苷酸與肌內脂肪含量的關系，分析不同基因型在肌苷酸與肌內脂肪含量性狀形成中的貢獻，挑選高肌苷酸與肌內脂肪含量個體的基因型組合，分析高肌苷酸與肌內脂肪含量個體基因型組合形成的選配方式，應用這些選配方式形成優質肉雞高肌苷酸與肌內脂肪含量的多基因聚合核心群。

2.根據權利要求1所述優質肉雞肌苷酸與肌內脂肪含量相關基因聚合的選育方法，其特征在于，所述第一引物如下：上游引物1F：5’-TCTCCTTCCACAGGCTCAA-3’；下游引物1R：5’-AACTGCTGCACTGCACGAT-3’；所述第二引物P2如下：上游引物2F：5’-ACAGTTGCCAGTCTGATTA-3’；下游引物2R：5’-CATCGCCAGAGTTAGAAGT-3’；所述第三引物P3如下：上游引物3F：5’-GGAATGTGACAACGCTAA-3’；下游引物3R：5’-CGGATAAGGAGGGCAGAG-3’。

3.根據權利要求1所述優質肉雞肌苷酸與肌內脂肪含量相關基因聚合的選育方法，其特征在于，所述第一引物擴增腺苷琥珀酸裂解酶基因外顯子9，用于篩選優質肉雞腺苷琥珀酸裂解酶基因位點的突變，第二引物擴增甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉甲基酶基因5’非編碼區，用于篩選優質肉雞甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸轉甲基酶基因位點的突變，第三引物擴增脂肪細胞脂肪酸結合蛋白基因內含子2，用于篩選優質肉雞脂肪細胞脂肪酸結合蛋白基因位點的突變。