[發明專利]輪葉蒲桃離體培養和快速繁殖的方法

有效

• 申請號: 201310431291.5
• 申請日: 2013-09-22
• 公開（公告）號: CN103477988A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 呂秀立;練發良;張慶費;戴海英;吳曉春;王軍峰;宋艷冬;李澤建;雷珍
• 申請（專利權）人: 麗水市林業科學研究院;上海市園林科學研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于植物快繁方法技術領域，具體為輪葉蒲桃離體培養和快速繁殖。

背景技術

輪葉蒲桃（Syzygium?grijsii）系桃金娘科蒲桃屬常綠灌木，樹體矮小，冠形規則緊湊，葉片細小有光澤，全株無毛，枝葉濃密，花朵粉白色，雄蕊眾多，花絲纖細優美，給人以干凈清爽之感。嫩葉彩葉期較短，約6-8d，隨著葉片的成熟，彩葉慢慢變為綠色，但由于輪葉蒲桃有多次抽梢的習性，自早春起至有凍害發生前，新梢幾乎不間斷的抽發，為此其嫩葉彩色效果也可持續很長的時間，具有很好的觀賞效果，是傳統常用的盆景制作材料。輪葉蒲桃病蟲害少，適應性強，自然分布于長江中下游以南的湖北、湖南、江西、浙江、安徽、福建、廣東、廣西、貴州等地的干燥貧瘠山地中，習性喜陽亦耐陰，耐干旱瘠薄，是難得的集優良觀賞性和環境適應性于一體的優良木本觀賞植物資源。由于輪葉蒲桃特點明顯，優點突出，受到園林植物研究人員的重視和園林工程人員的青睞。

輪葉蒲桃目前絕大多數種苗為籽播苗，個體間性狀分離嚴重，形態差異顯著，例如嫩葉葉色有深紅色、橙紅色、淡紅色、嫩綠色等；葉形有長橢圓形、橢圓形、卵形、菱形；葉片的大小有米葉、細葉、小葉；不同個體間抗寒能力也不同，這為實生選種建立優良無性系提供了良好契機。

輪葉蒲桃枝條纖細，積累營養成分少，在不同季節進行扦插，成活率均不高，且受季節限制，結果不穩定，多代扦插引起種苗性狀退化。到目前為止，未見國內其它研究機構或種苗企業有系統的繁育研究報道。

發明內容

本發明涉及一種輪葉蒲桃離體培養和快速繁殖的方法，可在離體條件下快速繁殖輪葉蒲桃，且生產的輪葉蒲桃種苗品質高，一致性好。

本發明在單株選優的基礎上，采用直接器官發生形式，通過對培養基成分、激素配比以及培養環境因子的確定，建立了輪葉蒲桃完整的再生體系，以芽繁芽進行組培快繁生產出來的試管苗無變異發生，可以保持母本的優良性狀，為優良單株的繁育進而形成品系，為后期的推廣應用奠定了堅實基礎。

本發明解決上述技術問題所采取的技術方案包括下述步驟：取帶腋芽的枝條作為外植體，并對外植體進行清洗消毒處理；將外植體接種到初代培養基中，進行初代培養；將初代培養的無菌苗轉入增殖培養基，該增殖培養基為改良WPM+BA0.1~1.5mg·L^-1+NAA0.01~0.5mg·L^-1+蔗糖20~40g·L^-1+瓊脂4~12?g·L^-1，誘導不定芽；將誘導出的叢生芽分切后，轉移至壯苗培養基，進行壯苗培養；試管苗分切后，轉移至生根培養基1/2改良WPM+IBA0.05~1.5?mg·L^-1?+蔗糖15~35g·L^-1+瓊脂4~12g·L^-1；最后將生根試管苗清洗，移至基質中栽種。

其中所用到的培養基及激素包括：

改良WPM培養基（Woody?Plant?medium，以下簡稱WPM），本發明中使用的改良WPM培養基，主要是大量元素的調整，藥品成分含量如下：?

NH₄NO₃??????????????????100mg·L^-1

Ca(N0₃)₂·4H₂O?????????????226mg·L^-1

CaCl₂·2H₂O????????????????36mg·L^-1

MgSO₄·7H₂0???????????????200mg·L^-1

KH₂PO₄???????????????????100mg·L^-1

K₂SO₄????????????????????190mg·L^-1

其余微量元素、鐵鹽、有機元素含量以及培養基的配置為現有公開技術，在此不再贅述。

1/2改良WPM是指改良WPM培養基中大量元素減半，而其余藥品成分不變。