[發明專利]水飛薊黃酮木脂素的去甲基衍生物及其制備方法和其用途

有效

• 申請號: 201310428712.9
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN104447717A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 楊東輝;張瑩;張英濤;蔡少青
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: C07D407/04
• 分類號: C07D407/04;A61P25/28;A61P35/00;C12P17/06;C12R1/01
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種水飛薊黃酮木脂素的衍生物及其制備方法和其用途。?

背景技術

水飛薊(Silybi?Fructus)為菊科植物水飛薊Silybum?marianum(L.)Gaertn.(Milk?thistle)的干燥成熟果實，原產于南歐、北非，收載于《中華人民共和國藥典》(2010版)，性涼，味苦，歸肝、膽經，具有清熱解毒、疏肝利膽的功效，臨床上用于肝膽濕熱，脅痛，黃疸等肝膽疾病。水飛薊主要包括6個黃酮木脂素類化合物的同分異構體，分別為水飛薊賓A/B(silybin?A/B，兩個非對映異構體)、異水飛薊賓A/B(isosilybin?A/B，兩個非對映異構體)、水飛薊亭(silychristin)和水飛薊寧(silydianin)。這類黃酮木脂素化合物已被開發成中成藥水飛薊素(又名益肝靈、利肝泰、西利馬靈、利肝隆，CAS?NO.65666-07-1)，臨床上用于急、慢性肝炎，早期肝硬化，中毒性肝損傷等疾病的治療；水飛薊黃酮類成分也是保肝寧、飛當片等保肝利膽藥的重要原料；在美國及歐洲將其有效成分水飛薊賓作為抗氧化食品添加劑。?

發明內容

本發明的目的是提供一種水飛薊黃酮木脂素的衍生物及其制備方法和其用途。?

本發明提供的一種水飛薊黃酮木脂素是如式Ⅰ或式Ⅱ所示的化合物：?

本發明的還一個目的是提供式Ⅰ、式Ⅱ、式Ⅲ所示化合物或式Ⅳ所示化合物的制備方法，?

包括下述步驟1)和2)：?

1)將含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物加入培養基基礎中；所述培養基基礎為?適合菌株Eubacterium?limosum?ZL-II?CGMCC?NO.6846生長或發酵的培養液；?

2)將含Eubacterium?limosum?ZL-II?CGMCC?NO.6846的菌液接種于步驟1)制備的培養基中，37℃培養48h即得。?

所述方法中，所述步驟1)中，含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物與培養基基礎的質量體積比為2∶1；所述質量的單位以g計，體積的單位以L計。?

所述方法中，所述步驟1)中，所述將含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物加入培養基基礎中后，還要121℃高壓滅菌15min，然后室溫放置備用。?

所述方法中，所述步驟2)中，所述菌液與步驟1)制備的培養基的體積比為1∶5；所述含Eubacterium?limosum?ZL-II?CGMCC?NO.6846的菌液的OD₆₀₀為1.826。?

所述的方法中，所述培養基基礎具體為庖肉培養基基礎，其組成為：蛋白胨30.0g/L，牛肉粉5.0g/L，酵母5.0g/L，葡萄糖3.0g/L，磷酸二氫鉀5.0g/L，可溶性淀粉2.0g/L，溶劑為水。?

所述含Eubacterium?limosum?ZL-II?CGMCC?NO.6846的菌液的制備方法為：取Eubacterium?limosum?ZL-II?CGMCC?NO.6846的凍存液室溫融化，加入厭氧液體培養基中37℃培養24h后，如此循環進行菌株的擴增。?

所述含Eubacterium?limosum?ZL-II?CGMCC?NO.6846的菌液的制備方法中，所述凍存液與厭氧液體培養基的體積比為1∶5；之后重復按照體積比1∶10的比例接種于厭氧液體培養基中擴大體系增菌，直至獲得OD₆₀₀＝1.826的500ml菌液。?

所述厭氧液體培養基的組成為：蛋白胨15.0g/L，酵母5.0g/L，大豆蛋白胨5.0g/L，牛肉粉5.0g/L，葡萄糖5.0g/L，氯化鈉5.0g/L，可溶性淀粉3.0g/L，半胱氨酸0.5g/L，磷酸二氫鉀2.5g/L，血紅素0.005g/L，和維生素K₁0.001g/L，溶劑為水。?

所述含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物具體為從菊科水飛薊屬植物水飛薊?Silybum?marianum果實中采用甲醇提取的黃酮類化合物的混合物，該黃酮類化合物的混合物主要包括水飛薊素，所述水飛薊素包括水飛薊賓、異水飛薊賓、水飛薊寧和水飛薊亭。?

所述含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物具體為每18.0g的混合物中，含式Ⅴ所示化合物5.006％、式Ⅵ所示化合物7.692％、式Ⅶ所示化合物24.006％和式Ⅷ所示化合物14.726％，所述百分數為質量百分含量。?