[發明專利]與小麥穗粒重主效基因位點緊密連鎖的分子標記及其獲取方法和應用

無效

• 申請號: 201310427364.3
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN103436533A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 許云峰;安調過;王瑞芳;童依平;劉冬成;張愛民;李濱
• 申請（專利權）人: 中國科學院遺傳與發育生物學研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68
• 代理公司: 石家莊國域專利商標事務所有限公司 13112
• 代理人: 蘇艷肅

技術領域

本發明涉及小麥分子生物技術與育種應用領域，具體地說是一種與增加小麥穗粒重主效基因位點緊密連鎖的分子標記及其獲取方法和應用。

背景技術

小麥是世界上最主要的糧食作物之一，也是我國第二大糧食作物，其高產、穩產直接影響到我國人們生活水平和國家糧食安全。提高小麥單產、培育高產新品種是確保我國小麥總產水平、保障糧食安全的根本出路。小麥產量性狀是復雜的數量性狀，受多個數量性狀基因位點（Quantitative?trait?locus，QTL）控制，具有遺傳力低、受環境影響大、選擇難度高的特性，所以在選育高產小麥品種時，傳統的育種方法常存在時間長、耗費大、成本高、成果小的問題。分子標記輔助育種是一種采用與特定性狀相關聯的分子標記作為輔助手段進行育種的有效方法，具有不受環境條件限制、在植物發育的各個組織和生育時期均可檢測、選擇效率高的優勢。

穗數、穗粒數和千粒重是小麥產量構成的三要素。數十年來，在提高小麥產量方面，通過增加穗數和千粒重來提高小麥產量已經取得較大進展，目前較難取得進一步突破。穗粒重由穗粒數和粒重組成，選育小穗數、穗粒數多，且穗粒數和粒重協調發展的新品種類型，即穗粒重高的高產品種類型是提高小麥產量潛力、培育高產新品種的重要研究方向（何中虎等，作物學報，2011，37：202-215）。因此，研究穗粒重基因，通過分子標記技術，提高小麥穗粒重獲得高產小麥新品種，在育種工作中具有極其重要的意義。

發明內容

本發明的目的就是提供一種與小麥穗粒重主效基因位點緊密連鎖的分子標記及其獲取方法和應用，通過發明獲得的與穗粒重主效基因位點緊密連鎖的分子標記，來檢測小麥品種或品系中是否具有增加穗粒重的基因位點，以加快小麥高產品種的選育進程。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

本發明所提供的一種與小麥穗粒重主效基因位點緊密連鎖的分子標記，該分子標記為Xcfd80.2和Xbarc146.1，其所述分子標記Xcfd80.2的左端引物序列如SEQ?ID?NO:1所述、右端引物序列如SEQ?ID?NO:2所述；所述分子標記Xbarc146.1的左端引物序列如SEQ?ID?NO:3所述、右端引物序列如SEQ?ID?NO:4所述。

一種與小麥穗粒重主效基因位點緊密連鎖的分子標記的獲取方法，它包括以下步驟：采用分子標記Xcfd80.2的引物，

左端引物序列??ATAGGGGTTTTGAATCACTCC（如SEQ?ID?NO:1所述）、

右端引物序列??TTGGATTTGCAGAGCCTTCT（如SEQ?ID?NO:2所述）

和分子標記Xbarc146.1的引物，

左端引物序列??AAGGCGATGCTGCAGCTAAT（如SEQ?ID?NO:3所述）、

右端引物序列??GGCAATATGGAAACTGGAGAGAAAT（如SEQ?ID?NO:4所述）

對小麥品種京411的DNA分別進行PCR擴增，其PCR擴增體系為20?μl，包括：左、右端引物（10?μmol/L）各1.0?μl，10×Buffer?2.0?μl，Mg²⁺（25?mmol/L）?1.2?μl，Taq酶（5?U/μl）0.2?μl，dNTP（2.5?mmol/L）0.6?μl，DNA（30?ng/μl）2.0?μl，其余用ddH₂O補足；PCR擴增程序為：94℃預變性7?min；94℃變性30?s，60/51℃退火45?s，72℃延伸60?s，34個循環；72℃后延伸7?min；最后10℃終止反應；擴增產物分別在8%聚丙烯酰胺凝膠上電泳分離后，獲得的擴增產物的分子量分別為160?bp和142?bp，即得到與小麥穗粒重主效基因位點QKws.cas-6A緊密連鎖的分子標記。

本發明所述的與小麥穗粒重主效基因位點緊密連鎖的分子標記在選育高產小麥中的應用，即為將與小麥穗粒重主效基因位點緊密連鎖的分子標記用于檢測小麥品種或品系的方法，該方法它包括以下步驟：