[發(fā)明專利]一種豬繁殖與呼吸綜合征復(fù)合活疫苗用凍干保護(hù)劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310426405.7
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN103495180A
• 公開（公告）日: 2014-01-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李陽;閆艷麗;劉雪;王二先;徐曉艷;盛璐絲
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江美保龍生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: A61K47/46
• 分類號: A61K47/46;A61K47/42;A61K47/36;A61K47/22;A61K39/39;A61P37/04;A61K39/12;A61P31/14
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

1.一種豬繁殖與呼吸綜合征復(fù)合活疫苗用凍干保護(hù)劑，其特征在于該凍干保護(hù)劑每1000ml磷酸緩沖液中含有中藥多糖30～100g、中藥黃酮20～60g、維生素6～10g、法氏囊素2～16mg、明膠4～6g和蔗糖40～70g，所述的中藥多糖和中藥黃酮從以下中藥組合物中提取得到：生地、懷牛膝、桑白皮、茯苓、蘆根、淫羊藿、生甘草和問荊。

2.如權(quán)利要求1所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征復(fù)合活疫苗用凍干保護(hù)劑，其特征在于該凍干保護(hù)劑每1000ml磷酸緩沖液中含有中藥多糖50～80g、中藥黃酮30～50g、維生素7～9g、法氏囊素4～12mg、明膠5～6g和蔗糖50～60g。

3.如權(quán)利要求1所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征復(fù)合活疫苗用凍干保護(hù)劑，其特征在于所述的中藥多糖和中藥黃酮通過以下步驟制得：

a、按生地10～30份、懷牛膝20～40份、桑白皮10～20份，茯苓10～30份、蘆根10～30份、淫羊藿10～30份、生甘草10～20份、問荊10～30份稱取各中藥原料，切碎、洗凈后用冷水浸泡過夜，再加入原料重量15倍的純化水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小時，熬制過程中每10分鐘攪拌一次；

b、棄去a中藥渣，收集藥液，室溫冷卻后經(jīng)10000rpm離心10分鐘，棄去沉淀，收集上清；

c、將b中上清進(jìn)行醇沉，沉淀即為粗制中藥多糖，上清即為粗制中藥黃酮；

d、用滅菌純化水洗滌c中粗制中藥多糖，洗滌后用20倍量的42℃滅菌純化水進(jìn)行溶解，溶解后，按0.5%比例加入活性炭4℃吸附過夜，吸附后經(jīng)10000rpm離心10分鐘，棄去沉淀，收集上清；

e、將d中上清經(jīng)0.22um濾膜過濾除菌后，進(jìn)行10倍濃縮，制得中藥多糖濃縮液；

f、將e中中藥多糖濃縮液進(jìn)行真空冷凍干燥即得到中藥多糖；

g、將c中粗制中藥黃酮進(jìn)行減壓真空濃縮，濃縮物用次滅菌注射用水稀釋清洗，再次進(jìn)行減壓真空濃縮，如此三次后，再經(jīng)0.22um濾膜過濾除菌，然后經(jīng)冷凍真空干燥即得到中藥黃酮。

4.如權(quán)利要求1所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征復(fù)合活疫苗用凍干保護(hù)劑，其特征在于所述的維生素含有維生素B1?15～35%、維生素C?40～70%和維生素E?10～30%。

5.如權(quán)利要求1所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征復(fù)合活疫苗用凍干保護(hù)劑，其特征在于所述的法氏囊素通過以下步驟制得：取健康法氏囊組織，將法氏囊組織剔除筋膜和脂肪組織，?pH7.2滅菌冷PBS洗凈；按1：1比例加入pH?7.2滅菌冷PBS，在組織勻漿機(jī)中進(jìn)行高速勻漿；勻漿液中加入2.5%的胰蛋白酶，反復(fù)凍融3次，12000rpm離心20min，棄沉淀；上清用1000da截留分子量的超濾膜進(jìn)行超濾，膜下液經(jīng)0.22um濾膜過濾除菌，濾過液即為法氏囊素粗提液；粗提液經(jīng)冷凍真空干燥制得法氏囊素凍干粉。