[發明專利]α-玉米醇溶蛋白組分的提取方法

有效

• 申請號: 201310424492.2
• 申請日: 2013-09-17
• 公開（公告）號: CN103570815A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 宋镕光;李帆;石彤非
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春應用化學研究所
• 主分類號: C07K14/425
• 分類號: C07K14/425;C07K1/14
• 代理公司: 長春菁華專利商標代理事務所 22210
• 代理人: 南小平

技術領域

本發明涉及一種蛋白提取工藝，具體涉及一種α-玉米醇溶蛋白組分的提取方法。

背景技術

玉米是世界上最廣泛和重要的農業作物之一。玉米中約含干物重10%的蛋白質，其中50%～60%為醇溶蛋白。玉米醇溶蛋白(zein)由于其環境友好，很好的生物相容性，低吸水性，高耐熱性和良好的機械性能，作為新型材料被廣泛應用于藥物、包裝、紡織纖維等領域。

玉米醇溶蛋白以混合物的形式存在，它由alpha，beta，gamma，delta四種組分構成。近幾年來，人們發現純化后的α-組分具有特別的性質，特別適合作為食品、包裝及生物醫藥產品的初始原料。當前α-組分的純化方法是：首先，用70%丙酮作為溶劑，40℃提取4小時，再蒸發，濃縮沉淀；其次，溶于95%乙醇，用1%NaCl沉淀，再用丙酮脫色。雖然上述純化方法能夠達到純化α-zein的目的，但是得到的α-zein的量只有微克級無法滿足工業應用。并且上述純化方法很難有效分離玉米醇溶蛋白中的核黃素（Lutein）。

發明內容

本發明為解決上述技術問題，提供一種能夠高效分離玉米醇溶蛋白中的核黃素的，高純度的α-玉米醇溶蛋白組分的提取方法。

為了解決上述技術問題，本發明的技術方案具體如下：

α-玉米醇溶蛋白組分的提取方法，該方法主要包括以下步驟：

（1）、將玉米醇溶蛋白溶于N-甲基吡咯烷酮或DMSO；

（2）、將上述溶液在二氯甲烷或乙醚中反復萃取；

（3）、將萃取后的沉淀物溶于90%以上醇溶液，離心取上清液，并用水稀釋至濃度50%以下，過濾；

（4）、將過濾的固體用正己烷或石油醚洗滌，真空干燥后得到白色α-zein粉末。

在上述技術方案中，步驟（2）中所述反復萃取的次數為2～6次。

在上述技術方案中，步驟（3）中所述的醇溶液為甲醇溶液、乙醇溶液、乙二醇溶液或異丙醇溶液。

本發明的有益效果是：

本發明提供的α-玉米醇溶蛋白組分的提取方法，是將玉米醇溶蛋白溶于溶劑N-甲基吡咯烷酮或DMSO，再于二氯甲烷或乙醚中萃取，除去玉米醇溶蛋白中核黃素的；再用90%以上醇溶液除掉其余的組分，最后提取出的α-zein的含量高、純度較高，適合工業化生產。如附圖1所示，萃取3次后，玉米醇溶蛋白中核黃素的殘余量僅為6%，萃取5次后，核黃素不被檢出。如附圖2所示，中間為標準蛋白標樣，兩側為純化的α-zein蛋白，分子量分別為Z19，23KDa和Z22，26KDa。檢測結果與文獻中報道符合，說明純化產物為α-zein組分。

本發明提供的α-玉米醇溶蛋白組分的提取方法的副產物為核黃素，可用作抗氧化劑或食用色素，與合成色素相比的安全性要高。并且，本發明的方法所用的溶劑，均可以通過簡單處理進行回收，便于工業化生產。

附圖說明

圖1為核黃素的¹H?NMR圖。

圖2為實施例1得到的白色α-zein粉末的十二烷基硫酸鈉-丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）圖。

圖3為α-玉米醇溶蛋白組分的提取方法的工藝流程圖。

具體實施方式

下面結合附圖對本發明做以詳細說明。

實施例一

1份玉米粉溶于5份50-75%乙醇，離心取上清液。加水稀釋直至不再有蛋白析出，后晾干，得到玉米醇溶蛋白。用正己烷等溶劑去除玉米醇溶蛋白中的油脂，取1份脫脂Zein溶于30份N-甲基吡咯烷酮中，在90份的二氯甲烷反復萃取3次去除核黃素。最后用90%以上乙醇溶液洗滌，離心取上清液，用水稀釋至濃度50%以下，過濾；將過濾的固體用正己烷洗滌，真空干燥得到白色α-zein粉末。附圖1為核黃素的¹H?NMR圖，該圖說明萃取3次后，玉米醇溶蛋白中核黃素的殘余量僅為6%。附圖2為得到的白色α-zein粉末的十二烷基硫酸鈉-丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）圖，圖中間為標準蛋白標樣，兩側為純化的蛋白，分子量分別為Z19，23KDa和Z22，26KDa。檢測結果與文獻中報道符合，說明純化產物為α-zein組分。

實施例二

1份脫脂Zein溶于30份DMSO中，在90份的乙醚中反復洗滌5次去除核黃素。最后用90%以上甲醇溶液洗滌，離心取上清液，用水稀釋至濃度50%以下，過濾；將過濾的固體用石油醚洗滌，真空干燥得到白色α-zein粉末。附圖1為核黃素的¹HNMR圖，該圖說明萃取5次后，玉米醇溶蛋白中核黃素不被檢出。