[發明專利]一種楤木懸浮細胞培養的方法無效
| 申請號： | 201310423763.2 | 申請日： | 2013-09-17 |
| 公開（公告）號： | CN103444547A | 公開（公告）日： | 2013-12-18 |
| 發明（設計）人： | 楊存 | 申請（專利權）人： | 南京通澤農業科技有限公司 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 210046 江蘇省南京市*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 懸浮 細胞培養 方法 | ||
1.一種楤木懸浮細胞培養的方法，包括無菌葉片的獲得，愈傷組織的誘導，愈傷組織的增殖，懸浮細胞的培養和優化，其主要步驟如下：
（1）按照常規植物組織培養的消毒方法對楤木葉進行消毒處理，獲得無菌的楤木葉片；
（2）將步驟（1）所獲得的楤木無菌葉片接種到愈傷組織誘導培養基MS+NAA?0.5mg/L+IBA?3mg/L中進行愈傷組織誘導；
（3）將步驟（2）誘導出來的楤木愈傷組織接種到愈傷組織增殖培養基MS+6-BA?1-2mg/L+2，4-D?0.2-0.5?mg/L中進行增殖培養；
（4）將步驟（3）增殖過的楤木愈傷組織接種到MS+KT0.2-0.4mg/L+TDZ0.05-0.2mg/L培養基中振蕩培養，繼代培養3代，得到楤木懸浮細胞。
2.按照權利要求1所述的一種楤木懸浮細胞培養的方法，其特征在于：步驟中所述無菌的楤木葉片按下列消毒方法得到：將楤木葉片用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉浸泡三分鐘，流水沖洗25min，超凈工作臺上氯化汞消毒處理8min，無菌水沖洗4-5次，然后用無菌的濾紙吸去葉片表面的水分。
3.按照權利要求1所述的一種楤木懸浮細胞培養的方法，其特征在于：步驟中楤木愈傷組織誘導的條件為溫度25℃，暗室培養，濕度30%~60%。
4.按照權利要求1所述的一種楤木懸浮細胞培養的方法，其特征在于：步驟中楤木愈傷組織增殖的條件為溫度25℃，光照強度1000-2000lx，光期10h，暗期14h，濕度30%~60%。
5.按照權利要求1所述的一種楤木懸浮細胞培養的方法，其特征在于：步驟中愈傷組織懸浮細胞的培養，每50ml懸浮細胞添加100ml培養液，接種于250ml錐形瓶中進行懸浮振蕩培養。
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