[發明專利]一種枳椇懸浮細胞生產黃酮的方法

在審

• 申請號: 201310423711.5
• 申請日: 2013-09-17
• 公開（公告）號: CN103468632A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 楊存
• 申請（專利權）人: 南京通澤農業科技有限公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;C07D311/40
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種枳椇懸浮細胞生產黃酮的方法，其特征是：枳椇的葉片經消毒處理，接種在MS+NAA0.1~0.3?mg/L+IBA2~4mg/L愈傷組織誘導培養基上，將誘導出來的愈傷組織接入液體培養基MS+NAA0.1~0.3mg/L+?2，4-D0.3～1mg/L上進行懸浮細胞培養30天，待懸浮細胞生長穩定，在培養基中附加前體物誘導子檸檬酸進行枳椇懸浮細胞的調控，取培養出來的枳椇懸浮細胞使用微波提取方法提取黃酮，采用HPLC法檢測黃酮的含量。

2.根據權利要求1所述的一種枳椇懸浮細胞生產黃酮的方法，其特征是：所述的消毒處理為：選用枳椇幼嫩的葉片，用洗潔精浸泡三分鐘，自來水沖洗30分鐘，在超凈工作臺上用0.1％的升汞消毒9分鐘，無菌水沖洗?4-5?次。

3.根據權利要求1所述的一種枳椇懸浮細胞生產黃酮的方法，其特征是：誘導愈傷組織的條件為暗室培養，溫度25℃，濕度50%～60%，為防止愈傷組織褐化，培養基中加入少量VC。

4.根據權利要求1所述的一種枳椇懸浮細胞生產黃酮的方法，其特征是：培養基中加入的檸檬酸為過濾滅菌。

5.根據權利要求1所述的一種枳椇懸浮細胞生產黃酮的方法，其特征是：枳椇懸浮細胞提取方法為微波提取方法。

6.根據權利要求1所述的一種枳椇懸浮細胞生產黃酮的方法，其特征是：HPLC檢測條件：色譜柱，C18柱，甲醇-0.5%磷酸（55：45），流速1.5ml/min，注溫：29℃，波長360nm。