[發明專利]一種從紅鳳菜新鮮莖葉中提取分離總黃酮的方法

無效

• 申請號: 201310423000.8
• 申請日: 2013-09-17
• 公開（公告）號: CN103463159A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 任冰如;李維林;陳劍;呂寒;梁呈元;吳菊蘭;趙磊
• 申請（專利權）人: 江蘇省中國科學院植物研究所
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61K135/00;A61K127/00
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技術領域

本發明涉及從植物中提取分離有效成分的一種方法，具體是從紅鳳菜的新鮮莖葉中提取分離總黃酮。

背景技術

紅鳳菜(Gynura?bicolor?DC.)為菊科菊三七屬植物，別名血皮菜、觀音菜、觀音莧、紫背天葵等，主要分布于我國南方各地，全草入藥，味苷、辛，性涼，具有涼血止血、清熱消腫的功效，治咳血、血崩、痛經、血氣痛、支氣管炎、盆腔炎、中暑、阿米巴痢疾，外用治創傷出血、潰瘍久不收口、療瘡痛癤、甲溝炎。紅鳳菜還可作為蔬菜食用，近年來我國多個地區有栽培和銷售。

紅鳳菜中含有黃酮類成分。卓敏等從紅鳳菜中分離得到6個黃酮類化合物：山柰酚、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、高車前苷、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6→1)-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6→1)-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-雙-3-O-β-葡萄糖苷；呂寒等從紅鳳菜中分離得到5個黃酮類化合物：槲皮素、山柰酚、槲皮苷、異槲皮苷、蘆丁；呂寒等采用高效液相與多級質譜聯用法對紅鳳菜提取物中的黃酮類成分進行檢測，確定提取物中含有5個黃酮類化合物：槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6→1)-α-L-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6→1)-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖、槲皮素-3-O-鼠李糖苷、山柰酚。

可見，紅鳳菜的黃酮類化合物主要是槲皮素、山柰酚及其苷類成分，這些成分多具有保護心血管、抗腫瘤、抗糖尿病、抗氧化、抗炎、抗病毒等作用，從紅鳳菜中提取黃酮類化合物具有重要意義。

裴詠萍等研究了紅鳳菜總黃酮的提取工藝，以紅鳳菜的干燥葉片為原料，確定的最佳提取工藝是依次以12倍量、10倍量70％乙醇提取2次，2h/次。

卓敏等用紅鳳菜地上部分干樣，分別用95％、75％、60％乙醇冷浸提取，浸膏混懸于水中，先后用石油醚、醋酸乙酯萃取，醋酸乙酯部分經過反復硅膠柱、C₁₈柱、Sephadex?LH-20柱等層析，最終分離得到山柰酚等黃酮類單體化合物。呂寒等用紅鳳菜干品粉末，用70％乙醇熱回流提取，減壓濃縮揮去乙醇，冷卻沉淀，取上清液用大孔樹脂柱層析，依次用10％、20％、50％、95％乙醇洗脫，合并50％乙醇洗脫部分，反復硅膠柱層析，再結合聚酰胺柱層析和Sephadex?LH-20柱層析，得到槲皮素等黃酮類單體化合物。以上兩種紅鳳菜黃酮類物質的提取分離方法都采用干燥的地上部分為原料，提取物經過多次反復柱層析，采用氯仿、甲醇冼脫，步驟繁多，毒性較大。

呂寒等提供了一種紅鳳菜總黃酮提取物的制備方法(專利申請號：201010611189.X)，以干燥的紅鳳菜為原料，經過醇提、加水冷沉、大孔吸附樹脂層析2次，以乙醇-水梯度洗脫，得到紅鳳菜總黃酮提取物。以蘆丁為對照品，用0.1mol·L^-1AlCl₃·6H₂O顯色，比色法測定總黃酮含量，結果顯示該提取物中的總黃酮含量可達50％以上。該方法也以干燥的紅鳳菜為原料，經過2次大孔吸附樹脂層析，方法簡便，但所得提取物中的總黃酮含量較低。

李法慶等提供了一種從新鮮紅鳳菜中提取紫色素及總黃酮的方法(專利申請號201110218685.3)，以新鮮紅鳳菜為原料，用乙醇溫浸提取，提取液經過超濾系統超濾一納濾系統濃縮—離子交換樹脂層析一大孔吸附樹脂層析等步驟，獲得總黃酮結晶物，濾出干燥后得到總黃酮。該方法以新鮮紅鳳菜為原料，得到總黃酮結晶產物，但該法用到超濾系統和納濾系統，設備條件要求高，操作步驟多。

本發明以紅鳳菜新鮮莖葉為原料，無需干燥加工，既節省勞力又降低能耗；本發明僅需2次柱層忻，工藝簡單，操作方便；本發明可得到高含量的總黃酮提取物，采用高效液相(HPLC)技術檢測，析出的結晶部分總黃酮含量達到90％以上，母液部分總黃酮含量達到80％以上；本發明層析分離所采用的填料為大孔樹脂和聚酰胺，方便易得、價格便宜且可再生，洗脫液采用乙醇和水，生產成本低廉；本發明在總黃酮提取分離的整個流程中，涉及的溶劑僅有乙醇和水，操作安全，產品無殘毒，對環境無污染。

發明內容

本發明的目的是提供一種工藝簡單、成本低廉、操作安全、能耗低、對環境無污染、可用于工廠化生產的方法，從紅鳳菜的新鮮莖葉中提取分離高純度總黃酮。