[發明專利]一種可用于結核感染診斷的結核分枝桿菌重組抗原的制備有效
| 申請號: | 201310422989.0 | 申請日: | 2013-09-16 |
| 公開(公告)號: | CN103525829A | 公開(公告)日: | 2014-01-22 |
| 發明(設計)人: | 王宏偉;高千;張俠;蘇忠蘭;易龍;丁一冰;田曼 | 申請(專利權)人: | 南京大學(蘇州)高新技術研究院 |
| 主分類號: | C12N15/31 | 分類號: | C12N15/31;C12N15/70;C12N15/10;C07K14/35;C12Q1/68;C12Q1/04;G01N33/68;G01N33/569 |
| 代理公司: | 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250 | 代理人: | 李紅團 |
| 地址: | 215123 江蘇省蘇州*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 結核 感染 診斷 分枝桿菌 重組 抗原 制備 | ||
1.一種編碼結核分枝桿菌重組抗原ESPC的重組DNA,其特征在于所述重組DNA的序列如SEQ?ID?NO.1所示。
2.一種結核分枝桿菌重組抗原ESPC,其特征在于所述重組抗原ESPC的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。
3.一種表達載體,其特征在于其含有如權利要求1所述的重組DNA。
4.一種如權利要求3所述的表達載體,其特征在于所述表達載體是pET-32a-ESPC,其通過將SEQ?ID?NO.1所示DNA克隆到pET32a表達載體的Eco?I和Hind?III酶切位點制備而成。
5.一種用于制備權利要求1所述重組DNA的方法,其特征在于,以結核分枝桿菌H37Rv基因組序列為模板,用引物P1和P2進行PCR擴增,其中引物P1和P2的序列如下:
引物P1:GGAATTCCATATGACGGAAAACTTGACCGTCCAG
引物P2:CCCAAGCTTTCAGGTAAACAACCCGTCGATAGC。
6.一種用于制備如權利要求2所述結核分枝桿菌重組抗原ESPC的方法,其特征在于通過將如權利要求3或4所述表達載體轉化大腸桿菌,通過異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導,經金屬螯合層析及凝膠過濾層析分離而制備獲得。
7.如權利要求6所述的方法,其特征在于,所述大腸桿菌為BL-21(DE3)。
8.一種組合物,其特征在于包含如權利要求2所述結核分枝桿菌重組抗原ESPC。
9.一種試劑盒,其特征在于包含如權利要求2所述結核分枝桿菌重組抗原ESPC。
10.如權利要求1所述重組DNA或者如權利要求2所述結核分枝桿菌重組抗原ESPC用于制備檢測結核分枝桿菌感染的試劑、組合物或試劑盒的用途。
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