[發明專利]一種PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒

有效

• 申請號: 201310416741.3
• 申請日: 2013-09-12
• 公開（公告）號: CN103451303A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 凌曉光;狄峰;蔣雅麗
• 申請（專利權）人: 江蘇康克生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 楊海軍

1.一種PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒，包括有擴增人的ERCC1基因對應的引物、GAPDH內參基因對應的引物，其特征在于：還包括有校準品人乳腺癌細胞T47D。

2.根據權利要求1所述的PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒，其特征在于：

所述的人的ERCC1基因對應的引物是指：

ERCC1上游引物：5'-GAAGGACAAACGGGGGGT-3'

ERCC1下游引物：5'-AGTGGGTAGCTCTGTGT-3'

所述的GAPDH內參基因對應的引物是指：

GAPDH上游引物：5'-GAAGGTGCAAGGTCGGAGT-3'

GAPDH下游引物：5'-GAAGATGGTAGCTGGGATTTC-3'。

3.根據權利要求1所述的PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒中還包括有ERCC1基因和GAPDH基因所對應的熒光探針。

4.根據權利要求3所述的PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒，其特征在于：所述的ERCC1基因的熒光探針是指：

5'-AATTTCTTCCCTGCTGGCGGCCC-3'

所述的GAPDH基因所對應的熒光探針是指：

5'-CAAGCTTCCCAGTCTCAGCC-3'。

5.根據權利要求4所述的PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒，其特征在于：所述的熒光探針的5’端是用FAM進行標記的，熒光探針的3’端是用BHQ1進行標記的。

6.根據權利要求1所述的PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒，其特征在于：試劑盒中引物和反應混合物的組成是：

ERCC1引物：上、下游引物各200?nM

ERCC1探針：200?nM

GAPDH引物：上、下游引物各200?nM

GAPDH探針：200?nM

2×反應液，包括有：

DNA聚合酶??2-4U

Mg²⁺???6.0-10.0mM

buffer???2*PCR?buffer?1μL

dNTP???400uM-600uM

sdH₂O補足至20μL。

7.根據權利要求1所述的PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒中還包括有：陽性對照和陰性對照。

8.根據權利要求7所述的PCR法檢測人ERCC1基因表達水平的試劑盒，其特征在于：所述的陽性對照是含ERCC1基因的重組質粒代替模板，陰性對照是dd?H₂O。