[發明專利]一種氯唑西林分子印跡聚合膜的制備方法

有效

• 申請號: 201310416024.0
• 申請日: 2013-09-12
• 公開（公告）號: CN103497350A
• 公開（公告）日: 2014-01-08
• 發明（設計）人: 傅強;孫敏;杜瑋;杜康麗;蔡剛;常春
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: C08J7/12
• 分類號: C08J7/12;C08J9/28;C08L27/16;C08F220/06;C08F226/06;C08F222/14;B01J20/26;B01J20/30
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 汪人和

技術領域

本發明屬于藥物測試技術領域，涉及一種用于測試氯唑西林的聚合膜，尤其是一種氯唑西林分子印跡聚合膜。

背景技術

氯唑西林（cloxacillin,CLOX），又名鄰氯青霉素，為廣譜半合成青霉素，具有耐酸、耐青霉素酶的特點，抗菌機制是抑制細胞壁合成，對革蘭陽性球菌和奈瑟菌有抗菌活性。在臨床上主要用于治療產青霉素酶的葡萄球菌引起的各種嚴重感染，如敗血癥、骨髓炎、呼吸道感染、心內膜炎及化膿性關節炎等。

但近年來，隨著抗生素的廣泛應用，氯唑西林因價格低廉、使用方便、抗菌作用強，在水產養殖上被廣泛用于治療魚、蝦和海參等水產品中細菌引起的疾病，所以氯唑西林的不合理使用已成為水產品的食用安全隱患，對漁業生產和生態環境都具有嚴重的危害。如水產品中氯唑西林藥物的殘留，可以破壞人體胃腸道菌群平衡和增強細菌耐藥性，給人類身體健康帶來危害。其中歐洲醫藥評價署（EMEA）、食品法典委員會（CAC）和我國農業部均已制定了氯唑西林的最大殘留限量（MRL），殘留標志物是氯唑西林，殘留檢測的對象是所有食品動物及其產品，MRL分別為300μg/kg（肝臟、腎臟、肌肉、脂肪），30μg/kg（奶）。而目前對氯唑西林生物樣品前處理方法主要是柱前衍生化法，將樣品制備成易于分析的形式，再進一步采用色譜技術、免疫技術或生物傳感技術進行定性和定量分析，但這種方法回收率低，選擇性差，內源性物質干擾大，有時甚至出現“假陰性”的情況。因此，建立一種測試費用低、操作簡便、靈敏度高的測定方法，對氯唑西林在動物源性食品中的殘留具有重要意義。

分子印跡技術(molecularly?imprinted?technique,MIT)是二十世紀八十年代迅速發展起來的一種化學分析技術,通常被人們描述為創造與識別“分子鑰匙”的人工“鎖”技術。它可以在聚合物中形成對模板分子具有特異性的結合位點。從應用角度來看，分子印跡聚合物又可分為不同的類型，其中分子印跡聚合物膜（MIM）與通常制備的棒狀或球狀的分子印跡聚合物（MIP）相比，具有操作簡便、耗能少、反應時間短、干凈無污染等特點；同生物膜相比，又具有耐惡劣環境、穩定性高、易于處理和應用的優點。同時MIM可克服傳統膜選擇性差的缺點實現從復雜體系中對目標化合物進行特異性吸附的作用。

目前，氯唑西林分子印跡膜的制備尚未見報道。

發明內容

本發明的目的在于克服上述現有技術的缺點，提供一種氯唑西林分子印跡聚合膜的制備方法。該方法測試費用低、操作簡便、靈敏度高。

本發明的目的是通過以下技術方案來解決的：

這種氯唑西林分子印跡聚合膜的制備方法，包括以下步驟：

（1）氯唑西林聚合液的制備

稱取氯唑西林并使之溶于致孔劑中，超聲，待氯唑西林完全溶解得20-100㎎/ml的氯唑西林有機溶液；

在上述氯唑西林有機溶液中，加入功能單體，其中模板分子與功能單體物質的量比為1:2—1:12；之后渦旋5—20min，使氯唑西林與功能單體充分預聚合；再加入交聯劑和引發劑，其中引發劑與功能單體的物質的量比為1:10—1:20；待混合均勻，即得所需氯唑西林聚合液。

（2）氯唑西林分子印跡聚合膜的制備

將上述氯唑西林聚合溶液通氮氣5-20min除氧，浸入聚偏氟乙烯膜，再通氮氣5-20min除氧后，靜置浸泡5—20min；取出完全浸透的聚偏氟乙烯膜置入已被除氧的器皿中，在紫外交聯儀下反應3—12h；將反應完全后得到的膜取出，用甲醇和冰醋酸的混合液洗脫至洗脫液檢測不出模板分子為止，然后再用50—80%的乙腈水溶液洗至中性，即得氯唑西林分子印跡聚合膜；

進一步，上述步驟（1）中所述致孔劑為二甲基乙酰胺DMAC、N-甲基吡咯烷酮NMP、二甲基甲酰胺DMF、甲醇和二甲基亞砜DMSO的一種或兩種以上組合。

進一步，上述步驟（1）中，所述功能單體為α-甲基丙烯酸MAA或4-乙烯基吡啶4-VPY；所述交聯劑為乙二醇二甲基丙烯酸酯EDMA和三甲氧基丙烷三甲基丙烯酸酯TRIM的一種或兩種的組合；所述引發劑為苯基雙（2，4，6-三甲基苯甲酰基）氧化膦TPO和偶氮二異丁腈AIBN的一種或兩種的組合。

進一步，將步驟（2）所得的氯唑西林分子印跡膜放在乙腈中保存，使用前在室溫條件下自然干燥1—2h即可。

進一步，步驟2）中，所述甲醇和冰醋酸的混合液中，甲醇和冰醋酸的體積比為1：（1-9）。

本發明具有以下有益效果：