[發明專利]一種合成卡貝縮宮素的方法

有效

• 申請號: 201310412014.X
• 申請日: 2013-09-10
• 公開（公告）號: CN103992390A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發明（設計）人: 程麗;楊東暉;路楊;周亮
• 申請（專利權）人: 杭州諾泰制藥技術有限公司
• 主分類號: C07K7/16
• 分類號: C07K7/16;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種合成卡貝縮宮素的方法，所述方法步驟如下：

步驟1，固相合成酰化的卡貝縮宮素7肽線性肽樹脂；

步驟2，去保護基Fmoc后，連接4-氯丁酸，然后裂解得到酰化的卡貝縮宮素7肽線性肽；

步驟3，液環得到卡貝縮宮素7肽環肽粗肽，然后純化凍干后得到卡貝縮宮素7肽環肽精肽；

步驟4，純化凍干后的卡貝縮宮素7肽環肽片段和H-Gly-NH₂.HCl?偶聯，得到卡貝縮宮素。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征是：

其中，步驟1所述的固相合成方法，以低成本的wang樹脂為起始原料，依次偶聯7個氨基酸，偶聯氨基酸順序為：Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Tyr(Me)-OH；

其中，步驟2所述去保護基Fmoc后，連接4-氯丁酸所用縮合試劑為：DIC，HOBt，操作過程為：將4-氯丁酸和HOBt用溶劑DMF溶解，冰浴冷卻溫度為0-10℃，加入?DIC，激活5分鐘后加入到反應柱中與脫完保護的樹脂進行反應，25-35℃下反應2小時，裂解條件為：裂解液為V_TFA:V_Tis=95:5，裂解溫度20-30℃，裂解時間2小時；

其中，步驟3所述的液環溶劑為V_H2O:?V_ACN=50:50，反應濃度為1mg/mL，反應溫度：20-25℃，反應液使用TEA調pH值至7-10；

其中，步驟4所述的卡貝縮宮素7肽環肽片段和H-Gly-NH₂.HCl?偶聯條件為：縮合試劑為：HOBt、DCC，反應溶劑為：DMF，反應溫度：在0^oC反應2小時，然后在25^oC反應6小時。

3.根據權利要求1?所述的方法，其特征是：固相合成時，起始樹脂選用Wang樹脂，降低了成本。

4.根據權利要求1?所述的方法，其特征在于：先得到卡貝縮宮素7肽環肽片段，然后再將其與H-Gly-NH₂.HCl?偶聯，有效避免了多甘和缺甘等雜質，得到高收率和高純度的卡貝縮宮素。