[發(fā)明專(zhuān)利]一種Hsa-miR-145-5p試劑盒及其成熟體模擬物的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310408755.0
• 申請(qǐng)日: 2013-09-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103667441B
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王斌全;高偉;張春明;陳鋼鋼;皇甫輝;溫樹(shù)信;馮彥
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68;C12N15/11;G01N33/68
• 代理公司: 太原華弈知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 14108
• 代理人: 李毅

1.一種Hsa-miR-145-5p試劑盒，其特征在于，是由以下組合試劑構(gòu)成的：

Hsa-miR-145-5p?基因定量檢測(cè)組分：包括Hsa-miR-145-5p?PCR引物，10mM濃度的dNTP，RNase抑制劑，microRNA/cDNA逆轉(zhuǎn)錄引物，5倍濃度的buffer液，M-MLV，2倍濃度的SYBR?Green?PCR?Master?Mix混合液及去離子水；

Hsa-miR-145-5p熒光原位雜交探針：為與Hsa-miR-145-5p堿基互補(bǔ)的堿基序列，并采用DNA骨架修飾，同時(shí)用熒光基團(tuán)cy3修飾；

FSCN1免疫組化組分：包括鼠抗人FSCN1單克隆抗體，鑲嵌過(guò)氧化物酶基團(tuán)的羊抗鼠二抗，山羊非免疫血清，100倍濃度的PBS及1‰?吐溫20混合液，DAB顯色色原、底物及緩沖液。

2.權(quán)利要求1所述的試劑盒在喉鱗癌預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用。

3.Hsa-miR-145-5p的成熟體的模擬物質(zhì)，序列為GUCCAGUUUUCCCAGGAAUCCCU，其特征在于，所有核苷酸進(jìn)行2’-甲氧基修飾，和/或5’端進(jìn)行硫代修飾，和/或3’端進(jìn)行硫代修飾，和/或在5’或者3’端連接膽固醇修飾。

4.權(quán)利要求3所述的Hsa-miR-145-5p的成熟體的模擬物對(duì)喉鱗癌細(xì)胞株Hep-2及TU-177中細(xì)胞惡性間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志物，即E-cadherin、N-cadherin、MMP-2及MMP-9蛋白的抑制表達(dá)。