[發明專利]甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法

有效

• 申請號: 201310406706.3
• 申請日: 2013-09-09
• 公開（公告）號: CN103487520A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 孫毅;田阿娟;喬陽;何捷
• 申請（專利權）人: 成都百裕科技制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 成都虹橋專利事務所(普通合伙) 51124
• 代理人: 高蕓;梁鑫

1.甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：采用基于手性配基交換流動相添加劑法的液相色譜檢測，HPLC檢測條件如下：

固定相：以5μm硅膠表面涂布有直鏈淀粉-三（3，5-二甲苯基氨基甲酸酯）為填充劑，或以5μm硅膠表面涂布有直鏈淀粉-三[（S）-α-甲苯基氨基甲酸酯]為填充劑；

流動相A：磷酸鹽緩沖溶液；流動相B：乙腈或乙醇；

其中，磷酸鹽緩沖溶液含：10mM-100mM磷酸二氫鉀，以磷酸調節pH至1.5-4.0；

以流動相A，流動相B按體積比50～90:50～10配制流動相；

流速：1.0ml/min；

柱溫：10～25℃；

檢測波長：220nm-260nm；

理論板數按帕珠沙星左旋異構體峰計算應不低于2500，帕珠沙星左、右旋體異構體之間的分離度應符合要求。

2.根據權利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：所述磷酸鹽緩沖溶液含：50mM磷酸二氫鉀，以磷酸調節pH值至2.0。

3.根據權利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：當流動相B為乙腈時，流動相A：流動相B體積比為70：30；流動相B為乙醇時，流動相A：流動相B體積比為60：40。

4.根據權利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：所述柱溫為20℃。

5.根據權利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：所述檢測波長為240nm。

6.根據權利要求1-5任一項所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：采用以甲磺酸帕珠沙星對照品為對照的外標法進行定量檢測，實施步驟為：

（1）供試品溶液的制備：取甲磺酸帕珠沙星注射液1ml，加樣品溶劑定容至甲磺酸帕珠沙星注射液的25～100倍體積量，搖勻，作為供試品溶液；

（2）對照品溶液的制備：精密稱取甲磺酸帕珠沙星對照品適量，用樣品溶劑溶解并稀釋制成每1ml約含帕珠沙星1～6μg的溶液，搖勻，作為對照品溶液；

（3）預試溶液的配制：取甲磺酸帕珠沙星消旋體適量，加樣品溶劑溶解并稀釋制成每1ml約含2～12μg帕珠沙星的溶液，搖勻，作為預試溶液；

檢測前，按照HPLC檢測條件，精密量取預試溶液20μl注入液相色譜儀，出峰順序依次為帕珠沙星的左旋異構體和右旋異構體；再取對照品溶液20μl注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使主成分峰的峰高約為滿量程的20%；再精密量取供試品溶液和對照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液色譜圖中如有與右旋異構體保留時間一致的色譜峰，按外標法以峰面積計算。

7.根據權利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：

（1）供試品溶液的制備：取甲磺酸帕珠沙星注射液1ml，加樣品溶劑定容至甲磺酸帕珠沙星注射液的50倍體積量，搖勻，作為供試品溶液；

（2）對照品溶液的制備：精密稱取甲磺酸帕珠沙星對照品適量，用樣品溶劑溶解并稀釋制成每1ml約含帕珠沙星3μg的溶液，搖勻，作為對照品溶液；

（3）預試溶液的配制：取甲磺酸帕珠沙星消旋體適量，加樣品溶劑溶解并稀釋制成每1ml約含6μg帕珠沙星的溶液，搖勻，作為預試溶液。

8.根據權利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：樣品溶劑為流動相。

9.根據權利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構體的手性固定相檢測法，其特征在于：所述甲磺酸帕珠沙星對照品為具有相同紫外吸收的甲磺酸帕珠沙星各種光學構型的對照品，包括：單一左旋構型的對照品，單一右旋構型的對照品，消旋體對照品，以及各種不同比例構型混合的對照品。