[發(fā)明專利]甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310406706.3
• 申請(qǐng)日: 2013-09-09
• 公開（公告）號(hào): CN103487520A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫毅;田阿娟;喬陽(yáng);何捷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 成都百裕科技制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所(普通合伙) 51124
• 代理人: 高蕓;梁鑫

1.甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：采用基于手性配基交換流動(dòng)相添加劑法的液相色譜檢測(cè)，HPLC檢測(cè)條件如下：

固定相：以5μm硅膠表面涂布有直鏈淀粉-三（3，5-二甲苯基氨基甲酸酯）為填充劑，或以5μm硅膠表面涂布有直鏈淀粉-三[（S）-α-甲苯基氨基甲酸酯]為填充劑；

流動(dòng)相A：磷酸鹽緩沖溶液；流動(dòng)相B：乙腈或乙醇；

其中，磷酸鹽緩沖溶液含：10mM-100mM磷酸二氫鉀，以磷酸調(diào)節(jié)pH至1.5-4.0；

以流動(dòng)相A，流動(dòng)相B按體積比50～90:50～10配制流動(dòng)相；

流速：1.0ml/min；

柱溫：10～25℃；

檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm-260nm；

理論板數(shù)按帕珠沙星左旋異構(gòu)體峰計(jì)算應(yīng)不低于2500，帕珠沙星左、右旋體異構(gòu)體之間的分離度應(yīng)符合要求。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：所述磷酸鹽緩沖溶液含：50mM磷酸二氫鉀，以磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.0。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：當(dāng)流動(dòng)相B為乙腈時(shí)，流動(dòng)相A：流動(dòng)相B體積比為70：30；流動(dòng)相B為乙醇時(shí)，流動(dòng)相A：流動(dòng)相B體積比為60：40。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：所述柱溫為20℃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：所述檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：采用以甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品為對(duì)照的外標(biāo)法進(jìn)行定量檢測(cè)，實(shí)施步驟為：

（1）供試品溶液的制備：取甲磺酸帕珠沙星注射液1ml，加樣品溶劑定容至甲磺酸帕珠沙星注射液的25～100倍體積量，搖勻，作為供試品溶液；

（2）對(duì)照品溶液的制備：精密稱取甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品適量，用樣品溶劑溶解并稀釋制成每1ml約含帕珠沙星1～6μg的溶液，搖勻，作為對(duì)照品溶液；

（3）預(yù)試溶液的配制：取甲磺酸帕珠沙星消旋體適量，加樣品溶劑溶解并稀釋制成每1ml約含2～12μg帕珠沙星的溶液，搖勻，作為預(yù)試溶液；

檢測(cè)前，按照HPLC檢測(cè)條件，精密量取預(yù)試溶液20μl注入液相色譜儀，出峰順序依次為帕珠沙星的左旋異構(gòu)體和右旋異構(gòu)體；再取對(duì)照品溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分峰的峰高約為滿量程的20%；再精密量取供試品溶液和對(duì)照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液色譜圖中如有與右旋異構(gòu)體保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：

（1）供試品溶液的制備：取甲磺酸帕珠沙星注射液1ml，加樣品溶劑定容至甲磺酸帕珠沙星注射液的50倍體積量，搖勻，作為供試品溶液；

（2）對(duì)照品溶液的制備：精密稱取甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品適量，用樣品溶劑溶解并稀釋制成每1ml約含帕珠沙星3μg的溶液，搖勻，作為對(duì)照品溶液；

（3）預(yù)試溶液的配制：取甲磺酸帕珠沙星消旋體適量，加樣品溶劑溶解并稀釋制成每1ml約含6μg帕珠沙星的溶液，搖勻，作為預(yù)試溶液。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：樣品溶劑為流動(dòng)相。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋異構(gòu)體的手性固定相檢測(cè)法，其特征在于：所述甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品為具有相同紫外吸收的甲磺酸帕珠沙星各種光學(xué)構(gòu)型的對(duì)照品，包括：?jiǎn)我蛔笮龢?gòu)型的對(duì)照品，單一右旋構(gòu)型的對(duì)照品，消旋體對(duì)照品，以及各種不同比例構(gòu)型混合的對(duì)照品。