[發明專利]一種降三萜類化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310404836.3
• 申請日: 2013-08-30
• 公開（公告）號: CN103450321A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 蕭偉;姚新生;許蒙蒙;王振中;段營輝;戴毅
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00;A61K31/56;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
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技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，特別涉及一種從現有中藥材中提取的降三萜類化合物及其制備方法和應用。

背景技術

接骨木為忍冬科植物接骨木Sambucus?williamsii?Hance的干燥莖枝。又名續骨木、大接骨丹、公道老、扦扦活、馬尿騷等。接骨木始載于《唐本草》，性味甘、苦、平，無毒；具有接骨續筋、活血止痛、祛風利濕之功效。主要用于治療跌打腫痛、骨折及創傷出血。

目前，從接骨木的藥用部位莖枝中分離出多種化學成分，包括熊果酸、齊墩果酸等三萜苷元類化合物，β-谷甾醇、胡蘿卜苷等甾醇類化合物以及香草醛、香草乙酮等酚酸類化合物。有資料報道，接骨木還含有豆甾醇、馬尾松樹脂醇、六種已知的木脂體苷、生物堿、蒽醌及其苷類、香豆素及其苷類、酚性成分、鞣質、油脂、強心苷及花青素類化合物、復合酯類等。

現代藥理研究表明，接骨木具有促進骨折愈合，抗骨質疏松、抗炎鎮痛、免疫活性、降血脂、提高學習記憶力、耐缺氧、抗氧化等作用。

研究人員在對接骨木進行深入的化學成分研究時，發現了一種新的化學成分，經查閱文獻可知，這是首次在接骨木中發現并鑒定出的新的化學成分，并經過檢索發現該化合物為新化合物。

發明內容

本發明從接骨木中制備提取出一種具有生物活性的降三萜類化合物，并提供了其在制備治療肝腫瘤疾病藥物中的應用。

具體地說，本發明提供了一種降三萜類化合物，其結構如式I所示：

本發明還提供了上述化合物的制備方法，包括如下步驟：

(1)接骨木干燥莖枝，粉碎，用40～80％乙醇加熱回流提取1～3次，合并提取液，干燥得接骨木提取物粉末。以適量水混懸后，經D101大孔樹脂柱色譜分離，依次以水、30％乙醇-水、40～60％乙醇-水、90～100％乙醇-水梯度洗脫，得到水洗脫部位、30％乙醇-水洗脫部位、40～60％乙醇-水洗脫部位、90～100％乙醇-水洗脫部位。

(2)合并步驟(1)中40～60％乙醇-水洗脫部位、90～100％乙醇-水洗脫部位兩部分，經ODS柱色譜分離，依次以40～60％甲醇-水、60～80％甲醇-水、100％甲醇-水梯度洗脫得到C-1、C-2、C-3共3個餾分。子餾分C3經過ODS中低壓柱色譜分離，用甲醇-水梯度洗脫，甲醇-水洗脫部分經Sephadex?LH-20柱色譜分離及高效液相色譜制備，得到本發明化合物。

上述制備方法中，步驟(2)所述制備高效液相色譜，以比例為100：0的甲醇-水為流動相，檢測波長為210與280nm，流速8mL／min，在制備液相上的保留時間為35.5min。

發明人通過理化性質和現代波譜學手段(HR-ESI-MS、¹H-NMR、¹³C-NMR、DEPT-135、¹H-¹H?COSY、HSQC和HMBC)對分離得到的化合物進行了結構鑒定，由HR-ESI-MS譜得出分子量為424，結合H譜和C譜，推測分子式為C₂₉H₄₄Ｏ₂，不飽和度為8。¹H-NMR譜顯示有兩個烯烴氫信號，兩個連氧亞甲基氫信號，6個單峰甲基氫信號。¹³C-NMR譜和DEPT-135譜中顯示29個碳：6個角甲基碳信號，9個sp³雜化亞甲基碳信號，3個sp³雜化次甲基碳信號，5個季碳信號，1個酮羰基碳信號，1個連氧亞甲基碳信號，4個烯烴碳信號，提示該化合物為含2個雙鍵的降五環三萜類化合物。由HSQC譜中將直接相關的C，H信號進行歸屬。HMBC譜中從6個單峰甲基氫信號出發推出該化合物的主要結構骨架，并結合¹H-¹H?COSY譜確認該化合物的結構(圖9)。最后由¹H-¹H?COSY譜推斷出兩個烯烴雙鍵的位置，從而確認了降碳的位置。綜上所述，證實該化合物為結構如式I所示的降三萜類化合物。

本發明的另一個目的在于提供一種式I所示化合物在制備治療肝腫瘤疾病藥物中的應用。發明人發現本發明化合物對人體肝腫瘤細胞有一定的抑制活性。

本發明的再一個目的在于提供一種藥物組合物，包含上述式I所示化合物。