[發(fā)明專利]賴氨酸、纖維素酶的發(fā)酵及包被飼料

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310403722.7
• 申請日: 2012-06-07
• 公開（公告）號: CN103444983A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馬吉銀;陳崇安;孟剛;曹洪;程耀東;劉鑫
• 申請（專利權(quán)）人: 寧夏伊品生物科技股份有限公司
• 主分類號: A23K1/00
• 分類號: A23K1/00;A23K1/16;C12P13/08;C12N9/42
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

?本發(fā)明屬于氨基酸的發(fā)酵領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及發(fā)酵制備L-賴氨酸制品的方法，其包括發(fā)酵產(chǎn)生L-賴氨酸發(fā)酵液，該發(fā)酵液可以與可發(fā)酵獲得的耐高溫脫水的纖維素酶混合，高溫干燥后用脂肪包被。另外，本發(fā)明還提供了所述方法生產(chǎn)的產(chǎn)品以及耐高溫脫水的纖維素酶等。

背景技術(shù)

纖維素酶能夠有效降解含纖維素的物質(zhì)（如，飼料），因此在飼料中添加纖維素酶能夠增強飼料的吸收利用率，從而節(jié)約飼養(yǎng)成本。例如，中國專利96196760.9公開了反芻動物飼料的酶添加物，其包含纖維素酶。

L-賴氨酸是重要的氨基酸原料，可以作為調(diào)味品、食品、飼料添加劑使用，也可以作為保健品、藥品中的有效或輔料成分，廣泛應(yīng)用于食品業(yè)、飼料業(yè)、制藥業(yè)及其他化學(xué)工業(yè)中。當(dāng)前，L-賴氨酸的生產(chǎn)主要是通過微生物的發(fā)酵生產(chǎn)的，如可以利用棒狀桿菌生產(chǎn)。

然而，當(dāng)賴氨酸作為飼料的時候，由于其屬于小分子營養(yǎng)物質(zhì)，很快就能釋放到動物體內(nèi)，尤其在大量攝取時，影響了動物吸收利用的效率。通常解決的方法是少量多次地喂食動物，但是這將增加動物飼養(yǎng)的工作量。因此，本發(fā)明提出了直接用賴氨酸發(fā)酵培養(yǎng)液制備包被的賴氨酸制品的方法，可以有效減緩賴氨酸在動物體內(nèi)釋放的速度。

常規(guī)地，包被的賴氨酸制品可以和含纖維素酶的酶添加劑在喂飼時一起混合入動物飼料中。這樣使用中比較麻煩，而且容易混合不均勻，相應(yīng)利用率降低。

本發(fā)明人設(shè)想，在制備包被的賴氨酸制品的過程中將纖維素酶與賴氨酸發(fā)酵培養(yǎng)液直接混合，可以混合地很均勻，然后進行包被，然而卻發(fā)現(xiàn)受制于包被中要經(jīng)歷的高溫以及干燥過程，常規(guī)的酶活性將極大地削弱，甚至完全喪失。令人意外地，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了一株耐熱且耐旱的霉菌菌株，經(jīng)過艱苦深入細致的研究，其中分離的纖維素酶經(jīng)歷高溫干燥后仍舊能夠保持高纖維素酶活性，因此適于在其中方便地使用，減少了喂飼時使用的麻煩。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供新的發(fā)酵制備L-賴氨酸制品的方法，其包括發(fā)酵產(chǎn)生L-賴氨酸發(fā)酵液，該發(fā)酵液可以與可發(fā)酵獲得的耐高溫脫水的纖維素酶混合，高溫干燥后用脂肪包被。另外，本發(fā)明還提供了所述方法生產(chǎn)的產(chǎn)品以及其中所用的物質(zhì)等。

???????具體而言，在第一方面，本發(fā)明提供了發(fā)酵制備L-賴氨酸制品的方法，包括，發(fā)酵產(chǎn)生L-賴氨酸發(fā)酵液，該發(fā)酵液可以與耐高溫脫水的纖維素酶混合，經(jīng)高溫干燥后收集的顆粒用脂肪包被。因此，本發(fā)明第一方面的方法發(fā)酵制備的L-賴氨酸制品分兩層，外層包裹內(nèi)層，其中外層是脂肪，而內(nèi)層含有L-賴氨酸和耐高溫脫水的纖維素酶。該L-賴氨酸制品能夠減緩賴氨酸在動物體內(nèi)釋放的速度，而且能夠具有纖維素酶活性。該制品優(yōu)選是飼料添加劑。

???????更具體地，在第一方面，本發(fā)明提供了發(fā)酵制備L-賴氨酸制品的方法，其包括：

（1）在發(fā)酵條件下培養(yǎng)導(dǎo)入了編碼吡啶核苷酸轉(zhuǎn)氫酶的多核苷酸的產(chǎn)L-賴氨酸的菌，獲得發(fā)酵液，過濾后保留濾液；?

（2）在發(fā)酵條件下培養(yǎng)導(dǎo)入了編碼耐高溫脫水的纖維素酶的多核苷酸的分泌表達菌，過濾后保留上清液；

（3）混合步驟（1）獲得的濾液和步驟（2）獲得的上清液，得到混合液；

（4）對步驟（3）獲得的混合液高溫噴霧干燥，并任選進行篩分和/或破碎，收集顆粒；和

（5）將步驟（4）收集的顆粒用脂肪包被。

脂肪包被顆粒可以通過流化制粒包衣機將熔化的脂肪噴涂在顆粒表面上來實現(xiàn)，因此優(yōu)選脂肪是室溫狀態(tài)下為固態(tài)而熔點略高于室溫（如，45-80℃，優(yōu)選50-65℃）的脂肪。優(yōu)選在本發(fā)明第一方面的方法中，脂肪優(yōu)選是分餾棕櫚脂肪，更優(yōu)選是百佳能（BergaFat），其可以通過商業(yè)途徑方便地獲取。在本發(fā)明的具體實施方式中，包被所用的脂肪是百佳能HTL316。

本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，脂肪層包被（噴涂）得越厚，制備得到的L-賴氨酸制品的抗降解能力越強。優(yōu)選在本發(fā)明第一方面的方法中，在步驟（5）中，步驟（4）獲得的顆粒和脂肪的重量比為2~8：8~2，優(yōu)選為3~7：7~3，更優(yōu)選為5~6.5：5~3.5。