[發明專利]一種抗禽流感病毒的樟芝發酵全液乙醇提取物的制備方法

在審

• 申請號: 201310403703.4
• 申請日: 2013-09-09
• 公開（公告）號: CN103860605A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 宋愛榮;趙晨;孔超;秦丹;梁大勇
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: A61K36/07
• 分類號: A61K36/07;A61P31/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種抗禽流感病毒的樟芝菌發酵全液乙醇提取物的制備方法，其特征是，所述樟芝菌發酵全液乙醇提取物由下述方法制得：

(1)加熱濃縮：取經液體發酵的樟芝菌發酵全液及菌絲體或澄清液放于容器內，在溫度50～70℃，壓力0.2～0.6Kg/cm²，真空度為0.02～0.06Mpa的條件下進行減壓濃縮，使減壓濃縮后的發酵全液或澄清液是原體積的1/4～1/2；

(2)?乙醇提取：經濃縮后的樟芝菌發酵全液或澄清液的溫度降到30℃以下，往容器中加入80%-95%的乙醇，使濃縮后的樟芝菌發酵全液或澄清液的醇溶液的醇度達到60～70%左右，然后繼續加熱，溫度控制在30～70℃，加熱時間是30～120分鐘；

(3)?過濾：之后冷卻、以180～200目的篩網過濾樟芝菌發酵全液或澄清液，收集濾液，濾渣以其4～8倍體積的80%-95%乙醇稀釋，重復上述操作1～2遍，離心收集濾液；

(4)減壓濃縮：離心完畢后棄去濾渣，合并收集的濾液，在溫度50～70℃，壓力0.2～0.6Kg/cm²，真空度為0.02～0.06Mpa的條件下進行減壓濃縮，回收乙醇，使濾液濃縮至原有體積的1/5～1/10；

(5)?收集物干燥：將上述濃縮液，在50～60℃溫度條件下干燥120～480小時，揮發多余的乙醇和水分；?

(6)?收集物粉碎：取上述烘干的收集物，置35℃條件下進行粉碎，經200目篩網過篩后，即為樟芝菌抗禽流感病毒活性的乙醇提取物；

其中，步驟(1)所述的樟芝菌發酵全液是指樟芝（Antrodia?camphorata）發酵液與菌絲體的集合體，

步驟(1)所述的樟芝澄清液是指樟芝（Antrodia?camphorata）發酵后澄清液。

2.如權利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝菌發酵全液乙醇提取物的制備方法，其特征在于所述樟芝發酵全液經分離獲得樟芝發酵菌絲體和樟芝發酵澄清液。

3.如權利要求1或2所述的抗禽流感病毒的樟芝菌發酵全液乙醇提取物的制備方法，其特征在于，所述樟芝發酵全液通過以下步驟獲得：

(1)液體種子培養：采用500毫升三角瓶，每瓶裝200毫升液體培養基，將10%的樟芝菌種以常規方法接種到裝有液體培養基的三角燒瓶內，調節pH為3-8，培養溫度為20-35℃，搖瓶轉速為80-280r/min，培養7-15天，即可得到樟芝液體種子；

(2)發酵罐發酵：先將發酵罐中的培養基進行滅菌，滅菌壓力為0.1～0.2公斤/平方厘米，滅菌時間為1-2小時；當樟芝液體種子pH值降至2.5-4時，將搖瓶中的樟芝種子接種到50L發酵罐的培養液中，調整pH為5-8，培養溫度25-35℃，通氣量0.5-1.1vvm，攪拌轉速100-250r/min，培養7-30天，即可獲得樟芝發酵全液。

4.如權利要求2所述的抗禽流感病毒的樟芝菌發酵全液乙醇提取物的制備方法，其特征在于，所述液體種子培養基或發酵培養基配方以克/100毫升計是：

玉米淀粉???????1～3%???????????????蔗??糖??????????1～5%

蛋白胨???????0.2～0.6%?????????????酵母膏????????0.2～0.5%

硫酸鎂???????0.1～0.3%?????????????磷酸二氫鉀???0.05～0.1%。

5.?如權利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝菌發酵全液乙醇提取物的制備方法，其特征是，所述樟芝菌株名為樟芝（Antrodia?camphorata）Ac001。

6.如權利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝菌發酵全液乙醇提取物的制備方法，其特征在于步驟(4)中所述濾液為乙醇水溶液，濃度為60-95%。

7.如權利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝菌發酵全液乙醇提取物的制備方法，其特征在于步驟(6)中所述收集物干燥使用真空干燥，真空度0.02-0.06Mpa，溫度50～60℃，干燥120～480小時。

8.?如權利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝菌發酵全液乙醇提取物的制備方法，其特征在于步驟(7)中所述收集物粉碎時，置35℃條件下進行粉碎，采用200目的中藥粉碎機對收集物進行粉碎過篩。