[發明專利]從莫勒菌中提取5α,8α-環二氧-24(R)-甲甾-6,22-二烯-3β-醇的方法

有效

• 申請號: 201310402936.2
• 申請日: 2013-09-07
• 公開（公告）號: CN103468778A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 邱君志;郭慶豐;張以盼;曹麗萍;何肖云;孟麗雪;董冬;凃潔;李小霞;姚靈丹
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12P33/20
• 分類號: C12P33/20;C07J71/00;A61P35/00;A61P33/06;C12R1/645
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種從莫勒菌中提取甾體化合物5α,?8α-環二氧-24(R)-甲甾-6,22-二烯-3β-醇的方法，其特征在于該方法包括以下步驟：

1）將莫勒菌活化后，取菌塊接種PDB培養基中，在120?r/min、26℃條件下連續培養7天，按10％接種量再次轉接到PDB培養基中，繼續在120?r/min、26℃條件下連續培養31天得發酵物；?

2）發酵物經抽濾得到菌絲體，菌絲體在35℃下恒溫干燥后，用甲醇浸提后旋蒸濃縮至干，用水溶解后用乙酸乙酯萃取，將乙酸乙酯萃取液濃縮得浸膏；

3）將浸膏上200~300目硅膠柱，進行粗分；分別以石油醚：二氯甲烷=(3:1,?2:1,?1:1)減壓硅膠柱洗脫；

4）將3）中得到的石油醚：二氯甲烷1:1洗脫成分,經減壓濃縮后上200~300目硅膠柱，以石油醚：乙酸乙酯體積比=5:1等度洗脫，經TLC分析，收集相同Rf值相同的洗脫液，旋蒸濃縮。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟1）中接種菌塊的大小為0.5×0.5cm，接種量為5塊。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟2）中浸提要用1-3倍體積甲醇浸提48小時，每8小時超聲20分鐘。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于步驟2）中具體操作為：發酵物經抽濾得到菌絲體，菌絲體在35℃下恒溫干燥后，用甲醇浸提后旋蒸濃縮至干，用200mL水溶解后與乙酸乙酯按體積比1：1.5混合，倒入分液漏斗中，搖瓶萃取菌液3~5次，每次5～10min。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟4)中石油醚：乙酸乙酯體積比=5:1等度洗脫，收集TLC分析中以石油醚：丙酮=3：1為展開劑時R_f值為0.2-0.3的組分。