[發明專利]基于代謝組學研究中的新鮮煙葉樣品質量判別的方法

有效

• 申請號: 201310401539.3
• 申請日: 2013-09-05
• 公開（公告）號: CN104422742A
• 公開（公告）日: 2015-03-18
• 發明（設計）人: 趙春霞;沈丹紅;路鑫;常玉瑋;張俊杰;趙燕妮;許國旺
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 劉陽

1.基于代謝組學研究中的新鮮煙葉樣品質量判別的方法，其特征在于：通過檢測新鮮煙葉中蕓香苷與山奈酚-3-O-蕓香糖苷（簡稱山奈酚苷）含量，計算其比值，對代謝組學研究中的新鮮煙葉樣品質量進行判別。

2.根據權利要求1所述判別方法，其特征在于：其具體方法為：1）稱取新鮮煙葉樣本，加入含內標的提取溶劑，超聲10-20分鐘后離心，將上清液移至進樣瓶中用于HPLC分析；

2）HPLC分析方法的具體參數：色譜柱Symmetry?C18（5μm4.6mm×250mm）；柱溫30℃；檢測波長340nm；進樣量5μL；柱流量1.0mL/min；流動相A為含體積濃度10%甲醇的水溶液（含體積濃度2%乙酸），流動相B為含體積濃度10%水的甲醇溶液（含體積濃度2%乙酸）；洗脫梯度：0min時90/10（A/B，V/V），15min時70/30(A/B，V/V)，26min時10/90(A/B，V/V)并保持2min至28min，28.1min時90/10（A/B，V/V），隨后保持起始梯度90/10（A/B，V/V）至35min；其中0-15min為第一段線性梯度洗脫、15-26min為第二段線性梯度洗脫。

3.根據權利要求2所述判別方法，其特征在于：所述內標為牡荊黃素，其含量為0.012g/L提取溶劑，所述提取溶劑為含體積濃度甲醇60-90%的水溶液，所述新鮮煙葉與含內標的提取溶劑按質量（mg）/體積（mL）比加入量為=25:1-3。

4.根據權利要求1或2所述方法，其特征在于：采用高效液相色譜法（HPLC）對新鮮煙葉樣品中的蕓香苷及山奈酚苷進行絕對定量分析，分析步驟如下：

HPLC分析數據可定性新鮮煙葉中的蕓香苷及山奈酚苷。通過測定一系列已知質量濃度（橫坐標X軸）的目標物峰面積，用其峰面積與內標物牡荊黃素的峰面積比值作為Y軸（縱坐標）繪制相應的標準曲線。通過標準曲線可對待測樣品中的蕓香苷、山奈酚苷進行絕對定量。

5.根據權利要求1所述判別方法，其特征在于：將蕓香苷與山奈酚苷質量含量的比值作為區分代謝組學合格樣品、變質的不合格樣品及部分變質的不合格樣品的標準，即待測品種中蕓香苷與山奈酚苷含量的比值在大于6.4的為合格樣品，可用于代謝組學分析，蕓香苷與山奈酚苷含量的比值在小于2.0的為變質的不合格樣品，蕓香苷與山奈酚苷含量的比值在2.0-6.4之間的為部分變質的不合格樣品。