[發明專利]一株能生物合成1,2?二氫睪內酯(testololactone)的簡單青霉及合成方法

有效

• 申請號: 201310400600.2
• 申請日: 2013-09-04
• 公開（公告）號: CN104419646B
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 吳洽慶;王玉;楊貝貝;陳曦;朱敦明;馬延和
• 申請（專利權）人: 中國科學院天津工業生物技術研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P33/20;C12R1/80
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技術領域

本發明涉及生物工程領域，本發明涉及一種生物合成1，2-二氫睪內酯(testololactone)的菌株及合成方法。

背景技術

1，2-二氫睪內酯，英文名為testololactone，化學式為C₁₉H₂₄O₃，分子量為302.41，白色或類白色粉末，CAS4416-57-3。1，2-二氫睪內酯作為一類激素類藥物，是第一代芳香酶抑制劑。它能夠抑制體內雌激素如雌二醇、雌酚酮的合成，使雌激素的產生減少，血液中雌激素的水平降低，用于假性性早熟的治療。此外，它的衍生物在臨床上用作細胞抗癌藥和治療男性不育等疾病(Dao T L.Estrogen synthesis in human breast tumor and its inhibition by testololactone and bromoandrostenedione.Cancer Research，1982，42：3338-3341；Cocconi G.First generation aromatase inhibitors--aminoglutethimide and testololactone.Breast cancer research and treatment，1994，30：57-80)。

通過化學合成法和微生物轉化法均可制備1,2-二氫睪內酯(testololactone)。有機化學合成上主要采用過氧化劑，但傳統氧化劑大多是有毒和／或易爆的，對環境污染大(Zinczuk J，Bacigaluppo J A，Colombo M I.An efficient and environmentally benign chemical synthesis of testolactone.Journal of the Brazilian Chemical Society，2003，14：970-974)。微生物轉化法制備1，2-二氫睪內酯條件溫和，有環境友好性，因而具有較大的應用前景。到目前為止，能催化雄甾烷或孕甾烷甾體化合物生成1,2-二氫睪內酯的微生物主要為青霉和曲霉，例如黃綠青霉以孕酮，雄甾-4-烯-3，17-二酮等為底物制備1，2-二氫睪內酯，(Liu H M，Li H P，Shan L H.Synthesis of steroidal lactone by penicillium citreo-viride.Steroids，2006，71(11-12)：931-934)，其底物投料濃度為1g／L，轉化時間5天，1,2-二氫睪內酯最高產率為73％；卡地干酪青霉以孕酮，3β-羥基-5-雄烯-17-酮，雄甾-4-烯-3，17-二酮等為底物制備1，2-二氫睪內酯，(Kolek T，Szpineter A，S'wizdor A.Studies on Baeyer-Villiger oxidation of steroids：DHEA and pregnenolone D-lactonization pathways in Penicillium camemberti AM83.Steroids，2009，74：859-862)，其底物投料濃度僅為0.67g／L；溜曲霉轉化17a-羥基孕酮，脫氧皮質酮為1,2-二氫睪內酯，底物投料 濃度低，副產物多且產率低(Hunter A C，Carragher N E.Flexibility of the endogenous progesterone lactonisation pathway in Aspergillus tamarii KITA：transformation of a series of cortical steroid analogues.Journal of Steroid Biochemistry&Molecular Biology，2003，87：301-308)。盡管已有上述研究，并取得了相應的研究成果，但是存在底物投料濃度低，轉化時間長，副產物多等問題，仍需要探索利用不同菌種轉化不同甾體底物制備1,2-二氫睪內酯的研究，從而提高投料濃度和產率，以進一步降低生產成本，同時減少對環境的污染。