[發明專利]一種從豬睪丸中提取玻璃酸酶的方法

無效

• 申請號: 201310400493.3
• 申請日: 2013-08-31
• 公開（公告）號: CN103451166A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 劉乃山;宋超龍;劉翠珍;劉振海
• 申請（專利權）人: 青島康原藥業有限公司
• 主分類號: C12N9/26
• 分類號: C12N9/26
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種從豬睪丸中提取玻璃酸酶的方法，其特征在于，采用酸液提取和硫酸銨鹽析得玻璃酸酶粗品，粗品再經超濾、熱原處理、凍干得玻璃酸酶精品。

2.權利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(一)提取：

將豬睪丸除內外皮層及付睪丸，絞成糜漿，稱取糜漿加酸液，攪拌、浸漬，過濾，濾液調pH；取濾渣再加酸液，攪拌、過濾，濾液調pH；

(二)粗制：

合并步驟(一)中的兩次濾液，在攪拌下，加入固體硫酸銨，攪拌溶解，靜置，過濾，留固體；量取濾液，在攪拌下，加入固體硫酸銨，溶解，靜置，過濾，合并兩次固體，得粗品；

(三)精制：

(1)超濾

粗品溶于水中，進行超濾；

(2)熱原處理：

將超濾液離心，過濾，將濾液放冰浴中冷卻，在濾液中加入磷酸三鈉(Na₃PO₄·12H₂O)溶液，在攪拌下，再緩緩加入醋酸鈣(Ca(CH₃COO)₂·H₂O)溶液，并調pH至8-9，離心，收集上清液，之后將上清液調pH至6.5～7.0；

(3)凍干

將濾液冷凍干燥，即得玻璃酸酶精品。

3.權利要求書2所述的方法，其特征在于，在步驟(一)中，第一次每1kg糜漿加酸液1.0-1.5L，第二次酸液仍根據開始糜漿量加入，每1kg糜漿加酸液0.2-0.3L。

4.權利要求書2所述的方法，其特征在于，在步驟(一)中，酸液提取后調節濾液的pH值均至3.2～4.0。

5.權利要求書2所述的方法，其特征在于，在步驟(二)中，第一次每1L濾液加固體硫酸銨230-260克，第二次每1L濾液加固體硫酸銨280-310克。

6.權利要求書2所述的方法，其特征在于，步驟(三)的(2)中的超濾液在過濾前以及調pH值至8-9后都要進行離心，離心時間：20分鐘～30分鐘，轉速：2700～3200r／min。

7.權利要求書2所述的方法，其特征在于，在步驟(一)中，所述酸液為冰醋酸，1mol／L鹽酸，氯化鈉和水的混合酸液。

8.權利要求書7所述的方法，其特征在于，所述混合酸液中冰醋酸，1mol／L鹽酸，水的體積百分比為1-5∶10-20∶150-220，氯化鈉的濃度為0.10-0.20mol／L。

9.權利要求書2所述的方法，其特征在于，在步驟(三)中，磷酸三鈉溶液的質量濃度為10％-20％，其加入量為濾液體積的5％-15％。

10.權利要求書2所述的方法，其特征在于，在步驟(三)中，醋酸鈣溶液的質量濃度為15％-25％，其加入量為濾液體積的5％-10％。