[發明專利]一種重樓藥材多指標快速檢測方法

有效

• 申請號: 201310399571.2
• 申請日: 2013-09-05
• 公開（公告）號: CN103487395A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 吳永江;劉博文;金葉;陳勇;劉雪松
• 申請（專利權）人: 浙江大學;云南白藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N21/3563
• 分類號: G01N21/3563;G01N21/359
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

1.一種重樓藥材多指標快速檢測方法，其特征在于，通過以下步驟實現：

（1）樣品的收集

收集不同批次的重樓藥材，隨機選擇其中20個樣品作為驗證集，其余樣品作為校正集進行定量校正模型的建立；?

（2）用傳統方法測定各關鍵質控指標

將樣品經預處理后采用高效液相色譜法測定重樓藥材中重樓皂苷-I、重樓皂苷-II、重樓皂苷-VII的含量，總皂苷含量為以上三種皂苷的總和；采用烘干稱重法測定重樓藥材中水分的含量；

（3）采集樣品的近紅外光譜圖

使用漫反射采樣器件采集近紅外光譜圖，采樣次數為32次，分辨率為8?cm^-1，以儀器內置背景為參比，掃描光譜范圍為4000~10000?cm^-1，每個樣品掃描重復3次，取平均光譜作為樣品的近紅外光譜；

（4）定量模型的建立

選擇合適的光譜波段和預處理方法得到重樓藥材特征光譜信息，采用偏最小二乘回歸法建立近紅外光譜與關鍵質控指標之間的校正模型，并根據模型評價指標來考察模型性能，將驗證集數據導入已建立的校正模型，驗證模型的穩定性和預測性能；?

（5）未知樣品中各關鍵指標的快速測定

將未知各關鍵質控指標值的重樓藥材，按校正集樣品相同近紅外光譜采集參數，采集未知樣品的近紅外光譜數據，并選擇相同的建模波段和光譜預處理方法，把特征光譜輸入步驟（4）所述的定量模型中，計算得到各關鍵指標值；

（6）根據以上近紅外分析技術測得的重樓藥材總皂苷含量≥0.6%且水分含量≤12%時，則判斷該重樓藥材為合格樣品，符合質量要求，投入提取的后續生產環節。

2.根據權利要求1所述的一種重樓藥材多指標快速檢測方法，其特征在于，步驟（2）所述的重樓樣品預處理方法為：將重樓藥材打粉，過80目篩，取細粉約0.5?g，精密稱定，置平底燒瓶中，精確加入甲醇10?mL，稱定質量，超聲波提取45?min，再稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，離心10?min（轉速為13000?rp·min^-1），取上清液用于高效液相色譜分析。

3.根據權利要求1所述的一種重樓藥材多指標快速檢測方法，其特征在于，步驟（2）所述的高效液相色譜法條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B），梯度洗脫0~25?min：25~95%A，25~30?min：95%A；檢測波長203?nm；流速：1.0?mL·min^-1；柱溫：30℃；進樣量：10?μL；理論板數按重樓皂苷-I峰計算應不低于4000。

4.根據權利要求1所述的一種重樓藥材多指標快速檢測方法，其特征在于，步驟（4）所述的各關鍵質控指標合適的光譜波段和預處理方法為：

重樓皂苷-I采用多元散射校正+一階導數+?Savitsky-Golay平滑的方法進行光譜預處理，建模波段為4500-4900?cm^-1和5550-6290?cm^-1；

重樓皂苷-II采用矢量歸一化+一階導數+Norris平滑的方法進行光譜預處理，建模波段為5449.8-7501.7?cm^-1；

重樓皂苷-VII采用多元散射校正+一階導數+?Norris平滑的方法進行光譜預處理，建模波段為4248.4-4601.3?cm^-1和5775.8-6101.7?cm^-1；

總皂苷采用多元散射校正+一階導數+?Savitsky-Golay平滑的方法進行光譜預處理，建模波段為4248.4-4601.3?cm^-1和5449.8-6101.7?cm^-1；

水分采用矢量歸一化+一階導數+Norris平滑的方法進行光譜預處理，建模波段為6099.7-7501.7?cm^-1。

5.根據權利要求1所述的一種重樓藥材多指標快速檢測方法在重樓藥材檢測中的應用。