[發明專利]一個花椰菜器官發育調控基因編碼序列及其應用

有效

• 申請號: 201310397370.9
• 申請日: 2013-09-05
• 公開（公告）號: CN103451190A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 王春國;李慧;陳成彬;宋文芹
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 朱紅星

技術領域

本發明屬于現代分子生物轉基因植物技術領域，涉及生物技術中一個在花椰菜器官發育中發揮關鍵調控作用的基因編碼序列及其在培育高生物量轉基因植物中的應用。

背景技術

自然界中不同植物物種間器官大小差異十分顯著，而在同一物種內相同基因型的不同植物個體間器官大小差異則非常小，表明植物器官大小發育受到嚴格的遺傳控制。器官大小是植物形態的一個重要特征，也是一個極具價值的農藝性狀，如種子大小、果實大小等直接影響農作物或經濟作物的產量和品質。因此揭示參與植物器官大小發育的調控因子及其作用機制對采用基因工程等手段提高作物產量和品質具有巨大的應用價值。

花椰菜(Brassica?oleracea?L.var.botrytis)是十字花科蕓薹屬甘藍種的一個變種，是重要的蔬菜作物，當前我國是世界上花椰菜種植面積最大的國家。其區別于其他十字花科植物的一個最顯著特征是在其生殖發育過程中會形成一個由大量增生的花序分生組織構成的特化器官——花球。花椰菜花球所表現出的這種生殖發育，特別是花發育特性使其成為研究十字花科植物器官發育特別是花器官發育的理想材料。

然而，目前對花椰菜器官發育分子調控機制認識十分有限。借助現代分子生物技術和手段，可以對調控花椰菜器官發育調控的基因進行鑒定、分離。相關基因的獲得及功能闡釋對于揭示花椰菜器官發育調控的分子基礎及采用基因工程手段干預植物器官發育進程，培育符合育種目標的高產作物或經濟植物具有重要價值。

發明內容

本發明的目的是公開一個在花椰菜器官發育中發揮關鍵調控作用的基因編碼序列，并提供一種利用該基因編碼序列，采用基因工程手段獲得高生物量轉基因植物的方法和應用。為實現此述目的，本發明公開了如下的技術方案：

一個在花椰菜器官發育中發揮關鍵調控作用的基因編碼序列，它由序列5’ATGATTCGTGAAATCTCCGGTCTACAAAACGACATCGTAAACATTCAAGAACGCTCTTCAAGCAGCAACAACAAGATCATGGACATGAGAAGAGATATTCGCCGACCAGCTCAAGCTCCTATGATGAGTAAGCAAGAATATTTTCGGACATTGTCGTCTCAGAACAGTCCGAGGAGGCTAATCTCAGCGAGTCACTTCAGTTTGGAGTCAATGGTTGTTCTTGTTGGTCTCACAGCATCGCTCTTGATCCTTCCCTTGATTCTTCCACCGTTGCCTCCTCCTCCGTTCATGCTGCTTCTCATTCCTATTGGGATAATGGTTCTGCTTATGGTTCTTGCTTTAATGCCTTCTTCTTCCTCTTCTTCTTCTTCTTCTAATGCCTTACATGTAACAAGAACTTATATGTAA3’組成(SEQ?ID?NO：1)。

本發明進一步公開了一種利用上述基因編碼序列培養高生物量轉基因植物的方法，它包括如下步驟：

(1)花椰菜總RNA提取及第一鏈cDNA合成；

(2)帶酶切位點引物設計、合成：利用生物學軟件設計帶XbaI和SacI酶切位點的引物：ARL-S：5’TCTAGAATGATTCGTGAAATCTCCG3’（下劃線表示XbaI酶切位點)；ARL-A：5’GAGCTCTTACATATAAGTTCTTGTTACATGT3’(下劃線表示SacI酶切位點)。引物序列由上海生物工程公司合成。