[發明專利]一種測定Kappa游離輕鏈濃度的試劑盒及方法

有效

• 申請號: 201310396461.0
• 申請日: 2013-09-03
• 公開（公告）號: CN103728455A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 王金鳳;蔣欣
• 申請（專利權）人: 柏榮診斷產品（上海）有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦

1.一種采用膠乳增強比濁方法測定Kappa游離輕鏈濃度的試劑盒，其包括反應緩沖液和Kappa游離輕鏈抗體溶液，其特征在于，所述的反應緩沖液中氯化鈉的濃度為1250～2400mmol/L。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的Kappa游離輕鏈抗體溶液中的Kappa游離輕鏈抗體為兔抗人多克隆Kappa游離輕鏈抗體。

3.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述的Kappa游離輕鏈抗體溶液中的Kappa游離輕鏈抗體為Dako公司的兔抗人多克隆Kappa游離輕鏈抗體。

4.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，當所述的反應緩沖液的組成為4-羥乙基哌嗪乙磺酸100mmol/L、氯化鈉1250～2400mmol/L、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L時，所述的Kappa游離輕鏈抗體溶液的組成為Dako公司的兔抗人多克隆Kappa游離輕鏈抗體0.5mg/ml、膠乳微球3mg/ml、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L。

5.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，當所述的反應緩沖液的組成為4-羥乙基哌嗪乙磺酸100mmol/L、氯化鈉1250mmol/L、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L時，所述的Kappa游離輕鏈抗體溶液的組成為Dako公司的兔抗人多克隆Kappa游離輕鏈抗體0.5mg/ml、膠乳微球3mg/ml、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L；或，當所述的反應緩沖液的組成為4-羥乙基哌嗪乙磺酸100mmol/L、氯化鈉2000mmol/L、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L時，所述的Kappa游離輕鏈抗體溶液的組成為Dako公司的兔抗人多克隆Kappa游離輕鏈抗體0.5mg/ml、膠乳微球3mg/ml、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L；或，當所述的反應緩沖液的組成為4-羥乙基哌嗪乙磺酸100mmol/L、氯化鈉1500mmol/L、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L時，所述的Kappa游離輕鏈抗體溶液的組成為Dako公司的兔抗人多克隆Kappa游離輕鏈抗體0.5mg/ml、膠乳微球3mg/ml、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L；或，當所述的反應緩沖液的組成為4-羥乙基哌嗪乙磺酸100mmol/L、氯化鈉2400mmol/L、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L時，所述的Kappa游離輕鏈抗體溶液的組成為Dako公司的兔抗人多克隆Kappa游離輕鏈抗體0.5mg/ml、膠乳微球3mg/ml、吐溫-201ml/L和防腐劑Proclin-3000.3ml/L。

6.一種測定Kappa游離輕鏈濃度的方法，其包括下述步驟：采用膠乳增強比濁方法，將待測樣品與如權利要求1～5中任一項所述的反應緩沖液和Kappa游離輕鏈抗體溶液混合后，計算吸光度變化ΔA，與標準品的工作曲線比較即可得到待測樣品的Kappa游離輕鏈濃度，其特征在于，待測樣品與反應緩沖液和Kappa游離輕鏈抗體溶液混合后的混合體系的氯化鈉濃度為1000～1600mmol/L。

7.如權利要求6所述的測定Kappa游離輕鏈濃度的方法，其特征在于，所述的吸光度變化ΔA由下述方法得到：將待測樣品與反應緩沖液混合后，37℃恒溫5分鐘，再加入Kappa游離輕鏈抗體溶液，30秒后測定吸光度為A₁；37℃恒溫4分30秒，測定吸光度為A₂，計算吸光度變化ΔA=A₂-A₁。

8.如權利要求6所述的測定Kappa游離輕鏈濃度的方法，其特征在于，所述的工作曲線由下述方法得到：將確定濃度的標準品與反應緩沖液混合后，37℃恒溫5分鐘，再加入Kappa游離輕鏈抗體溶液，30秒后測定吸光度為A₀₁；37℃恒溫4分30秒，測定吸光度為A₀₂，計算吸光度變化ΔA₀=A₀₂-A₀₁，以ΔA₀與標準品的確定濃度作圖，即可。