[發明專利]人免疫缺陷病毒-1NASBA-ELISA檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201310394793.5
• 申請日: 2013-09-04
• 公開（公告）號: CN103540684A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 尹銳;薛健;王艷芳;孫亞娟
• 申請（專利權）人: 薛健;尹銳
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于人免疫缺陷病毒-1型?NASBA-ELISA檢測試劑盒，其特征在于該試劑盒含有基因特異引物及探針，NASBA擴增緩沖液，酶混合液，擴增物檢測試劑，陰性對照，陽性對照。

2.根據權利1所述一種人免疫缺陷病毒-1型?NASBA-ELISA檢測試劑盒，包括基因特異引物和對應探針，所屬引物和對應探針是源于人免疫缺陷病毒-1基因組保守區域，序列為：

（1）?HIV-1基因的一對特異性引物：

F:5’-TGATGCAAGGTCGATATGAGCTCAATAAAGCTTGCCTGA-3’，?下劃線部分與檢測探針互補；R:5’-AATTCTAATACGACTCACT

ATAGGGGGGCGCCACTGCTAGAGA-3’，下劃線部分為T7啟動子序列。

（2）HIV-1基因特異探針：

捕獲探針：5’-Biotin-TCTGGTAACTAGAGATCCCTC-3’，為基因特異探針。

（3）檢測探針：5’-DIG-TGATGCAAGGTCGATATGAG-3’。

3.根據權利要求1所述人免疫缺陷病毒-1型?NASBA-ELISA?檢測試劑盒，其特征在于所述的NASBA擴增緩沖液及酶混合液：

（1）擴增緩沖液：40?mmol/I，pH8.5?Tris-HC1，120?mmol/L?KCl，10?mmol/L?MgC1，5?mmol/L?DTT，1?mmol/L?dNTP，10?mmol/L?NTP，100?g/L?DMSO。

（2）酶混合液：含40U?SupeScript?II反轉錄酶、80U?T7?RNA聚合酶、0.2U?核糖核酸酶H。

4.根據權利要求1所述人免疫缺陷病毒-1型?NASBA-ELISA?檢測試劑盒，其特征在于所述的NASBA擴增產物檢測試劑：

（1）96?孔酶標板：鏈酶親和素包被的酶標板

（2）雜交緩沖液：20×SSPE（?pH7.4），50mM/L?Tris-HCl?(?pH8.8)，1﹪?（W/V）BSA?43μl

（3）酶標抗體：堿性磷酸酶抗地高辛抗體?100μl

（4）洗液：PBST?溶液（含0.05%Tween-20，pH7.2，PBS）?450μl。

（5）顯色液：3mg?pNPP?溶于1mLddH2O?中,?加入1mL二乙醇胺，避光-20℃保存?，100μl

（6）終止液：0.5M?Na₂CO₃?溶液?100μl。

5.根據權利要求1所述人免疫缺陷病毒-1?NASBA-ELISA?檢測試劑盒，其特征在于所述的陰性對照為不含人免疫缺陷病毒-1型的正常人血清，陽性對照為含有人免疫缺陷病毒-1型的患者血清。