[發明專利]一種依替巴肽的液相合成方法

有效

• 申請號: 201310390106.2
• 申請日: 2013-08-30
• 公開（公告）號: CN103450346A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 高秀偉;高秀巖;任孝敏;王樸
• 申請（專利權）人: 煙臺海安多肽藥物研發技術有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/06;C07K1/02
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立

1.一種依替巴肽的液相合成方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）將H-Cys(Trt)-NH₂與Fmoc-Pro-OH進行偶合反應，然后再依次進行洗滌、干燥、減壓蒸餾、加乙醚重結晶后得到二肽Fmoc-Pro-Cys(Trt)-NH₂；然后脫除所述Fmoc-Pro-Cys(Trt)-NH₂中的Fmoc保護基，得到H-Pro-Cys(Trt)-NH₂；再將得到的所述H-Pro-Cys(Trt)-NH₂與Fmoc-Trp-OH進行偶合反應，然后再依次進行洗滌、干燥、減壓蒸餾、加乙醚重結晶后得到三肽Fmoc-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂；

2）將步驟1）中得到的Fmoc-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂中的Fmoc保護基脫除，得到H-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂；然后將所述H-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂與Fmoc-Asp(OtBu)-OH進行偶合反應，然后再依次進行洗滌、干燥、減壓蒸餾、加乙醚重結晶后得到四肽Fmoc-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂；再將所述Fmoc-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂中的Fmoc保護基脫除，得到四肽H-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂，備用；

3）將H-Gly-OMe與Cbz-Lys(Boc)-OH進行偶合反應，然后再依次進行洗滌、干燥、減壓蒸餾、加乙醚重結晶后得到二肽Cbz-Lys(Boc)-Gly-OMe；然后將所述Cbz-Lys(Boc)-Gly-OMe中的Cbz保護基脫除，得到H-Lys(Boc)-Gly-OMe；再將所述H-Lys(Boc)-Gly-OMe與Mpa(Trt)-OH進行偶合反應，然后再依次進行洗滌、干燥、減壓蒸餾、加乙醚重結晶后得到三肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-OMe；再將所述三肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-OMe用NaOH溶液水解，然后再依次用水和乙醚浸洗，得到三肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-OH，其中所述水和乙醚質量比為3:1；

4）將步驟2）中得到的四肽H-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂與步驟3）中得到的三肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-OH進行偶合反應，然后再依次進行洗滌、干燥、減壓蒸餾、加乙醚重結晶后得到線性七肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂；

5）將步驟4）得到的線性七肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂環化得到環肽

6）將步驟5）得到的溶于飽和的HCl和AcOEt溶液，脫除所述側鏈β-羧基上的-OtBu和ε-氨基上的-Boc的保護基，得到環七肽鹽酸鹽

7）將環七肽鹽酸鹽中Lys的側鏈氨基在三氧化硫脲作用下轉化為胍基，得到所述依替巴肽。