[發明專利]一種真菌C2H2型鋅指蛋白BbAzf及球孢白僵菌BbAzf的基因敲除載體有效
| 申請號： | 201310388680.4 | 申請日： | 2013-08-31 |
| 公開（公告）號： | CN103421101A | 公開（公告）日： | 2013-12-04 |
| 發明（設計）人： | 范艷華;裴炎;唐桂榮;周永紅;張永軍 | 申請（專利權）人： | 西南大學 |
| 主分類號： | C07K14/37 | 分類號： | C07K14/37;C12N15/31;C12N15/80;C12N15/66;C12N1/15;A01N63/04;A01P3/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 重慶博凱知識產權代理有限公司 50212 | 代理人： | 張先蕓 |
| 地址： | 400715*** | 國省代碼： | 重慶;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 真菌 c2h2 型鋅指 蛋白 bbazf 球孢白僵菌 基因 載體 | ||
【權利要求書】：
1.一種真菌C2H2型鋅指蛋白BbAzf，其特征在于，具有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列和SEQIDNO.2所示的氨基酸序列。
2.一種球孢白僵菌BbAzf的基因敲除載體，其特征在于，通過破壞BbAzf基因以提高球孢白僵菌中卵孢素的產量，獲得BbAzf的球孢白僵菌基因敲除子；
破壞該基因的方法，包括如下步驟：
1）以球孢白僵菌基因組作模板擴增得到BbAzf基因的左臂BbAzfL和右臂BbAzfR，亞克隆到pGEM-T上，獲得pGEM-BbAzfL和pGEM-BbAzfR；
2）分別用XbaI/HindIII酶切pGEM-BbAzfR，EcoRI酶切pGEM-BbAzfL，回收BbAzfR和BbAzfL片段，分別構建進pk2-bar載體，得pk2-BbAzfL-bar-BbAzfR；
3）將pk2-BbAzfL-bar-BbAzfR轉入根癌農桿菌LBA4404后，利用根癌農桿菌介導球孢白僵菌的遺傳轉化，并經PCR篩選獲得基因敲除子。
3.如權利要求2所述球孢白僵菌基因敲除子，應用于治療農林害蟲的真菌殺蟲劑。
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