[發明專利]負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架及制備方法

無效

• 申請號: 201310382877.7
• 申請日: 2013-08-28
• 公開（公告）號: CN103446617A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 郭瑞;張淵明;薛巍;藍詠
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: A61L15/32
• 分類號: A61L15/32;A61L15/44;C08J9/28
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉;陳燕嫻

技術領域

本發明屬于高分子材料技術領域，特別涉及一種負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架及制備方法。

背景技術

皮膚是人體最大的器官，主要分為表皮層、真皮層和皮下組織，對人體具有重要的屏障、機械、感知和調控的功能。但是皮膚是人體最脆弱和最容易受到傷害的器官之一，皮膚潰爛、創傷、手術損傷和燒傷是皮膚受損的重要原因，其中燒傷是皮膚受損的主要原因。據統計，全世界每年死于燒傷的人數約為30萬，而我國每年的燒傷患者約為1000萬，其中320萬需要皮膚移植。感染是制約燒傷皮膚愈合的重要因素，因為感染可以改變創面修復的正常過程，對燒傷和其他創傷類型都非常有害。在燒傷患者中，感染不僅破壞了創面愈合的微環境，有時甚至可以導致嚴重的全身并發癥。據估計燒傷致死率中約有75%是由感染所致。為了解決這個問題，研究人員把目光轉向了研發皮膚敷料或者替代物上，希望能夠從而降低感染對皮膚傷口帶來的問題又或者能夠抗感染，促進皮膚傷口愈合。

絲素蛋白是一種疏水性的蛋白質，力學性能優異，結構穩定，具有良好的生物相容性，而且來源豐富，成本低廉，是一種優良的天然的高分子材料。基于絲素蛋白這些優點，其一直廣泛運用在組織工程領域上，例如軟骨修復、網狀結締組織修復、骨修復和神經修復等方面。有研究表明，用絲素蛋白能夠促進成纖維細胞的增值，分化，對皮膚傷口愈合有促進作用，所以絲素蛋白能夠作為皮膚敷料使用，但是由于絲素蛋白本身沒有抗菌性能，這對絲素蛋白的使用有所限制，因此，制備一種具有抗菌能力的絲素蛋白支架成為亟待解決的問題。

硫酸慶大霉素是一種廣譜抗菌素，對革蘭氏陽性菌和陰性菌都很有效，廣泛應用于敏感菌引起的系統感染或局部感染,但長期服用或者在體內的血藥濃度過高，會帶來一系列的毒副作用，例如耳中毒、腎中毒、血尿,甚至過敏性休克后導致死亡,降低了臨床治療效果。為了降低硫酸慶大霉素的用藥量和在人體的毒副作用，但又保證其藥效，以期達到高效、低毒、低殘留的目的，必須研發出一種新型的藥物載體體系。

明膠，具有良好的生物相容性，已經廣泛被運用在生物醫學和藥物載體等方面上，特別是由明膠制備出來的微球，已經成為了一種很成熟的藥物載體體系。

近年來，利用絲素蛋白作為三維支架，在皮膚敷料上的應用和研究成為了熱點，有研究表明，用絲素蛋白作為皮膚敷料，在小鼠的全層皮膚損傷的修復實驗中，取得很好的效果；而明膠微球早已廣泛利用在生物醫學和藥物載體上；另一方面，如何改善硫酸慶大霉素在人體的投藥方式，降低血藥濃度和達到緩釋的效果，也是研究人員所關注的問題。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法。本發明所述的制備方法是將硫酸慶大霉素與明膠微球復合后負載在絲素蛋白多孔支架上，經過冷凍干燥的方法，形成復合支架。

本發明的另一目的在于提供由上述制備方法得到的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架。本發明制備的復合支架具有藥物緩釋功能，能夠降低了由于高的血藥濃度帶來的對人體的傷害，而且該支架抗菌效果明顯。

本發明的再一目的在于提供上述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：一種負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，包括如下步驟：

（1）將濃度為10～50mg/ml硫酸慶大霉素溶液滴加到明膠微球中，于4～25℃放置過夜，然后冷凍干燥，得到硫酸慶大霉素/明膠微球復合物；其中每克明膠微球加入硫酸慶大霉素溶液的量為2～10ml；

（2）將步驟（1）的硫酸慶大霉素/明膠微球復合物加入2～10wt%絲素蛋白溶液中，攪拌均勻，然后冷凍干燥，得到負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白多孔復合支架；每毫升絲素蛋白溶液加入10mg硫酸慶大霉素/明膠微球復合物；

步驟（1）中：

所述的10～50mg/ml硫酸慶大霉素溶液優選采用以下方法進行制備：將硫酸慶大霉素溶于去離子水中，攪拌均勻，得到濃度為10～50mg/ml硫酸慶大霉素溶液；

所述的明膠微球的粒徑優選為5～30μm，膨脹率優選為300～500%；