[發明專利]負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架及制備方法

無效

• 申請號: 201310382877.7
• 申請日: 2013-08-28
• 公開（公告）號: CN103446617A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 郭瑞;張淵明;薛巍;藍詠
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: A61L15/32
• 分類號: A61L15/32;A61L15/44;C08J9/28
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉;陳燕嫻

1.一種負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）將濃度為10～50mg/ml硫酸慶大霉素溶液滴加到明膠微球中，于4～25℃放置過夜，然后冷凍干燥，得到硫酸慶大霉素/明膠微球復合物；其中每克明膠微球加入硫酸慶大霉素溶液的量為2～10ml；

（2）將步驟（1）的硫酸慶大霉素/明膠微球復合物加入2～10wt%絲素蛋白溶液中，攪拌均勻，然后冷凍干燥，得到負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架；每毫升絲素蛋白溶液加入10mg硫酸慶大霉素/明膠微球復合物。

2.根據權利要求1所述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，其特征在于：步驟（1）中所述的10～50mg/ml硫酸慶大霉素溶液采用以下方法進行制備：將硫酸慶大霉素溶于去離子水中，攪拌均勻，得到濃度為10～50mg/ml硫酸慶大霉素溶液。

3.根據權利要求1所述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，其特征在于：步驟（1）中所述的明膠微球的粒徑為5～30μm，膨脹率為300～500%。

4.根據權利要求1所述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，其特征在于：步驟（1）中所述的明膠微球采用以下方法進行制備：將0.1g山梨糖醇酐油酸酯加到盛有100ml植物油的燒瓶中，于60℃攪拌0.5～5h后，通過滴加的方式，將10ml濃度為10wt%明膠水溶液加入到植物油中，繼續攪拌180min后，將溶液轉移至冰浴，持續攪拌30min，然后加入25wt%戊二醛水溶液0.1ml，繼續攪拌2h，加入4℃丙酮30ml，攪拌30min，靜置，過濾，得到微球；將微球泡在10ml丙酮中，于4℃固化24h后用1mol/L氨基乙酸浸泡30min，離心，取沉淀，用乙醇和異丙醇交替洗滌沉淀物，將清洗后的沉淀物置于去離子水中浸泡過夜，冷凍干燥，得到明膠微球。

5.根據權利要求4所述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，其特征在于：所述的攪拌的速度為300～400r/min；

所述的離心的條件為于25℃、10000r/min離心10min；

所述的冷凍干燥的條件為-60℃冷凍干燥24h。

6.根據權利要求1所述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，其特征在于：步驟（2）中所述的2～10wt%絲素蛋白溶液采用以下方法進行制備：將蠶繭剪碎，然后加入100℃，濃度為0.2wt%NaCO₃水溶液中煮2h，NaCO₃水溶液與蠶繭的比例為：100ml的0.2wt%NaCO₃水溶液加入5g蠶繭；脫膠后用去離子水清洗絲素至中性，于60℃烘干，得到絲素蛋白；取絲素蛋白，加入9.8mol/L溴化鋰水溶液中，40～60℃水浴加熱3～5h后用去離子水透析2～4天，離心，得到2～10wt%絲素蛋白溶液。

7.根據權利要求6所述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，其特征在于：所述的蠶繭為去蛹的蠶繭；

所述的透析用截留分子量為8000～12000的透析袋進行透析；

所述的離心的條件為于25℃、10000r/min離心10min。

8.根據權利要求1所述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架的制備方法，其特征在于：步驟（2）中所述的冷凍干燥的條件為-60℃冷凍干燥24h。

9.一種由權利要求1～8任一項所述制備方法獲得的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架，其特征在于孔隙率為75～95%，孔徑為50～200μm。

10.權利要求9所述的負載硫酸慶大霉素/明膠微球復合物的絲素蛋白支架在皮膚傷口愈合和傷口敷料領域應用。