[發(fā)明專(zhuān)利]一種檢測(cè)牛FANCI基因缺失的方法及試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310381613.X
• 申請(qǐng)日: 2013-08-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104419752A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-03-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李艷華;朱玉林;喬綠;張勝利;房靈昭;劉林;杜欣悅;王海浪;薛建華;呂小青;吳瑞杰;劉振君
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京奶牛中心
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.用于檢測(cè)牛短脊椎綜合征的引物對(duì)組，由引物對(duì)A和引物對(duì)B組成，所述引物對(duì)A由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA組成，所述引物對(duì)B由序列表中的序列3和序列4所示的兩條單鏈DNA組成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物對(duì)組，其特征在于：所述引物對(duì)組中的四條單鏈DNA在PCR反應(yīng)體系中的摩爾比為1：1：1：1。

3.含有權(quán)利要求1或2所述引物對(duì)組的試劑盒。

4.制備權(quán)利要求1或2所述引物對(duì)組的方法，包括將所述引物對(duì)組中的四條單鏈DNA分別單獨(dú)包裝的步驟。

5.權(quán)利要求3所述試劑盒的制備方法，包括如下步驟：將所述引物對(duì)組中的四條單鏈DNA分別單獨(dú)包裝后，與下述物質(zhì)中的至少一種包裝在同一試劑盒內(nèi)：PCR反應(yīng)緩沖液、DNA聚合酶和4種dNTP。

6.權(quán)利要求1或2所述引物對(duì)組，或權(quán)利要求3所述試劑盒在檢測(cè)待測(cè)牛的基因組中FANCI基因是否缺失的產(chǎn)品中應(yīng)用。

7.一種檢測(cè)待測(cè)牛的基因組中FANCI基因是否缺失的方法，包括如下步驟：

（a1）以待測(cè)牛的基因組DNA為模板，以權(quán)利要求1-3任一中所述的引物對(duì)組進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得PCR產(chǎn)物；

（a2）檢測(cè)步驟（a1）所得PCR產(chǎn)物的大小，按照如下方法確定所述待測(cè)牛的基因組中FANCI基因是否缺失：在PCR產(chǎn)物中含有大小為269bp的DNA片段的前提下，若所述PCR產(chǎn)物中同時(shí)含有大小為409bp的DNA片段，則所述待測(cè)牛的基因組中FANCI基因存在缺失，若所述PCR產(chǎn)物中不含有大小為409bp的DNA片段，則所述待測(cè)牛的基因組中FANCI基因不存在缺失。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用或權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述缺失為缺失所述FANCI基因中序列5的第231-3559位。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述大小為409bp的DNA片段為序列表中序列6所示的DNA片段；所述大小為269bp的DNA片段為序列表中序列7所示的DNA片段。

10.根據(jù)權(quán)利要求7-9中任一所述的方法，其特征在于：以所述引物對(duì)組進(jìn)行PCR擴(kuò)增的退火溫度為60℃。