[發(fā)明專利]一種對(duì)參麥注射液中麥冬皂苷D含量的測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310378711.8
• 申請(qǐng)日: 2013-08-27
• 公開（公告）號(hào): CN103412072A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃照昌;段秀芬;李紅艷;寸桂菊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 大理藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 昆明大百科專利事務(wù)所 53106
• 代理人: 何健

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉中藥有效成分測(cè)定方法，尤其是參麥注射液中麥冬皂苷D含量的測(cè)定方法。

背景技術(shù)

麥冬具有滋陰生津，潤(rùn)肺清心等功效，是臨床治療心血管疾病的重要組成藥味。其主要成分為甾體皂苷、多糖和高異黃酮類化合物。麥冬總皂苷主要含麥冬皂苷A、B、C、D及麥冬皂甙B′、C′、D′，其中麥冬皂苷A、B、C、D苷元為魯斯考皂苷元，麥冬皂甙B′、C′、D′苷元為薯蕷皂苷元。藥理研究表明:麥冬總皂苷具有抗心肌缺血損傷和抗心率失常作用。在川麥冬中總皂苷主要含麥冬皂苷D，麥冬皂苷D主要藥理作用有：顯著抑制靜脈血栓模型大鼠早期外周血中性粒細(xì)胞活化、粘附，減輕血栓重量，降低血清sICAM-1含量，降低炎癥反應(yīng)、抑制血栓形成。穩(wěn)定線粒體膜電位，減少鈣離子內(nèi)流，增加細(xì)胞活力，對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）有一定的保護(hù)作用。止咳、平喘、抗炎。

羅曉玲，邵青，瞿海斌等報(bào)道“HPLC—ELSD法測(cè)定參麥注射液中薯蕷皂苷元”，參麥注射液樣品中薯蕷皂苷元含量較低，約為4μg/mL；測(cè)定的苷元，無法判斷為那種皂苷的水解產(chǎn)物；且樣品處理繁瑣。

固相萃取（Solid?Phase?Extraction，SPE）就是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附，與樣品的基體和干擾化合物分離，然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。固相萃取作為樣品前處理技術(shù)，在實(shí)驗(yàn)室中得到了越來越廣泛的應(yīng)用。

麥冬，作為參麥注射液主要藥味之一，如何使麥冬中更多的活性成分在參麥注射液中得以體現(xiàn)，并能進(jìn)行測(cè)定控制，進(jìn)一步提高參麥注射液的有效性、可控性，是很多藥學(xué)工作者一直希望解決的事。發(fā)明人通過研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)參麥注射液進(jìn)行有機(jī)溶劑萃取、固相萃取后，能夠測(cè)定參麥注射液中的主要活性成分麥冬皂苷D。

參麥注射液現(xiàn)行版標(biāo)準(zhǔn)為WS₃-B-3428-98-2010，在標(biāo)準(zhǔn)中采用麥冬照藥材薄層色譜法對(duì)麥冬中水解產(chǎn)物—苷元進(jìn)行控制，和HPLC-ELSD法對(duì)麥冬中糖類成分進(jìn)行控制。麥冬含有甾體皂苷、多糖和高異黃酮類等多種化合物,麥冬皂苷具有抗心肌缺血損傷和抗心率失常等作用，而麥冬單體皂苷在參麥注射液中的控制尚未見報(bào)道。正是因?yàn)辂湺碥誅的好處很多，在醫(yī)療健康領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用，因此如何對(duì)參麥注射液中麥冬皂苷D的含量準(zhǔn)確測(cè)定是十分關(guān)鍵且意義重大的。另外，目前各大醫(yī)院在對(duì)患者使用參麥注射液治療時(shí)，主治醫(yī)師都不是很清楚所使用的參麥注射液中麥冬皂苷D的準(zhǔn)確含量，只能根據(jù)個(gè)人經(jīng)驗(yàn)來增減參麥注射液的使用瓶數(shù)來調(diào)整治療的進(jìn)度，這對(duì)患者而言，心里就沒有個(gè)低，不知道自己經(jīng)過治療到底是康復(fù)了多少，而且醫(yī)生本人也不清楚到底用了多少量的麥冬皂苷D，這就不能形成一個(gè)非常客觀、精確的數(shù)據(jù)來對(duì)治療過程進(jìn)行嚴(yán)格的評(píng)估。因此，發(fā)明人人經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的潛心研究，終于找到一種對(duì)參麥注射液中麥冬皂苷D的含量準(zhǔn)確測(cè)定的方法，該方法填補(bǔ)了對(duì)參麥注射液中麥冬皂苷D控制的空白，克服了上述的種種缺陷和不足。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的正是為了克服現(xiàn)有參麥注射液中麥冬皂苷D的準(zhǔn)確含量無法控制的缺陷而提供一種參麥注射液中麥冬皂苷D含量的測(cè)定方法，本該方法彌補(bǔ)了國內(nèi)沒有對(duì)參麥注射液中麥冬皂苷D的含量準(zhǔn)確測(cè)定的空白，且本發(fā)明技術(shù)方案的準(zhǔn)備工作簡(jiǎn)單、使用設(shè)備較少、成本低廉，且測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性高、精密度強(qiáng)。

本發(fā)明采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)。

一種對(duì)參麥注射液中麥冬皂苷D含量的測(cè)定方法，包含供試品溶液的制備、對(duì)照品溶液的制備、高效液相檢測(cè)；對(duì)照品溶液為含麥冬皂苷D0.2mg/ml的甲醇溶液，高效液相檢測(cè)條件為反相色譜柱，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，流動(dòng)相為水：乙腈為48：52，其特征在于，其中供試品溶液的制備方法為：

將待測(cè)定的參麥注射液置于分液漏斗中，加水飽和正丁醇萃取，合并正丁醇液，水浴蒸干，殘?jiān)铀芙猓咸幚砗玫腛DS小柱，控制上樣和洗脫過程流速不大于1.0ml/分鐘，先用水沖洗，再用濃度為10-55%的有機(jī)溶劑水溶液沖洗，最后用濃度為63-68%有機(jī)溶劑水溶液沖洗，收集該有機(jī)溶劑水溶液，水浴蒸干，殘?jiān)芙猓茨軌驕y(cè)定參麥注射液中麥冬皂苷D含量。