[發明專利]一種替度魯肽的制備方法

在審

• 申請號: 201310369843.4
• 申請日: 2013-08-22
• 公開（公告）號: CN104418949A
• 公開（公告）日: 2015-03-18
• 發明（設計）人: 張文治;潘俊鋒;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權）人: 深圳翰宇藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/20
• 代理公司: 深圳市深佳知識產權代理事務所(普通合伙) 44285
• 代理人: 唐華明

1.一種替度魯肽的制備方法，其特征在于，包括：

步驟1：將Fmoc-Asp(OtBu)-OH與固相載體偶聯，得到Fmoc-Asp(OtBu)-Resin；

步驟2：Fmoc-Asp(OtBu)-Resin按照替度魯肽順序逐一偶聯Fmoc保護的替度魯肽的4-32位氨基酸得到替度魯肽4-33片段肽樹脂H-Gly-Ser(tBu)-Phe-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Glu(OtBu)-Met-Asn(Trt)-Thr(tBu)-Ile-Leu-Asp(OtBu)-Asn(Trt)-Leu-Ala-Ala-Arg(pbf)-Asp(OtBu)-Phe-Ile-Asn(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Gln(Tr?t)-Thr-Lys(Boc)-Ile-Thr(tBu)-Asp(OtBu)-Resin；

步驟3：固相合成替度魯肽1-3片段肽樹脂Boc-His(Trt)-Gly-Asp(OtBu)-Resin，然后裂解得到替度魯肽全保護1-3肽片段Boc-His(Trt)-Gly-Asp(OtBu)-OH；

步驟4：替度魯肽4-33片段肽樹脂在固相上偶聯替度魯肽全保護1-3肽片段，得到替度魯肽樹脂；

步驟5：替度魯肽樹脂裂解得到替度魯肽粗肽；

步驟6：替度魯肽粗肽純化得到替度魯肽純品。

2.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟1）所述固相載體選自Wang?Resin、PAM?Resin、HMPA-AM?Resin、HMPA-MBHA?Resin樹脂。

3.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟1）所述固相載體的初始替代度為0.5mmol/g～1.0mmol/g。

4.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟2）所述Fmoc-Asp(OtBu)-Resin的替代度為0.2mmol/g～0.5mmol/g。

5.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟2）所述偶聯的偶聯試劑為HOBt/DIC。

6.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟3）所述固相合成的載體為CTC樹脂。

7.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟3）所述裂解的裂解劑為TFA與DCM的混合物或TFE與DCM的混合物。

8.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟4）所述偶聯的偶聯試劑為HATU/HOAt/DIPEA。

9.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟5）所述裂解的裂解劑為TFA、PhSMe、EDT、TIS與水的混合溶液。

10.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟6)所述純化為反相高效液相色譜純化。