[發明專利]布勞特菌AUH-JLD56及其在牛蒡苷元轉化中的應用

有效

• 申請號: 201310368975.5
• 申請日: 2013-08-22
• 公開（公告）號: CN103509741A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 王秀伶;劉明月;于秀梅
• 申請（專利權）人: 河北農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/04;C12R1/01
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 米文智

技術領域

本發明涉及細菌技術領域。?

背景技術

牛蒡子（Actium?lappa）為菊科草本植物牛蒡的干燥成熟果實，在我國古代醫藥典籍中多有記載，具有疏散風熱、宣肺透疹、消腫解毒等功效，臨床上則主要用于治療急性咽喉腫痛、風熱感冒、喉源性咳嗽和出疹性疾病等，迄今已有幾千年的使用史。由于牛蒡子毒副作用低，臨床應用中尚未見有不良反應的報告，因此，對牛蒡子中藥理活性物質的研究和挖掘已成為國內外研究熱點。木質素和揮發油是牛蒡子中的標志性化合物，目前已從牛蒡子中分離得到17種木質素類化合物，其中牛蒡苷（Arctiin，簡稱AT）是含量最高的木質素成分之一。研究表明，AT在酸性條件下或在人腸道微生物菌群產生的葡萄糖苷酶作用下，可被水解為牛蒡苷元（Arctigenin，簡稱AG），AG具有抗腫瘤、抗炎、抗病毒以及免疫調節活性，對肝細胞等具有保護作用（中草藥，39（3）:467-470,?2008）。?

牛蒡苷元被人體或其他動物攝入體內后可被寄居在腸道的微生物菌群轉化為不同代謝產物。早在1992年，日本學者Mitsuhiko?Nose等（Planta?Medicine,?58(6):520-523,?1992）利用小鼠腸道菌群轉化牛蒡苷元時曾檢測到3′-位脫去甲基的牛蒡苷元代謝產物，即3′-去甲基-牛蒡苷元（3′-desmethylarctigenin，簡稱3′-DMAG），由于代謝產物3′-DMAG?從未在天然牛蒡子提取物被檢出報道，故推測是小鼠腸道菌群將AG轉化為3′-DMAG。2007年，日本學者?Masao?Hattori等從人新鮮糞樣中分離了一株能將底物AG同時代謝為?7種不同代謝產物的真細菌屬菌株Eubacteriumsp.?ARC-2（Biological?and?Pharmaceutical?Bulletin,30（5）:?904-911,?2007），僅從高效液相色譜所出峰的峰面積來看，產物4（即4′-O-methyl-dihydroxyenterolactone）和產物7（即3′′-desmethylarctigenin）最高，產物1（即?dihydroxyenterolactone）的峰面積也較高，產物3′-DMAG為高效液相色譜圖Fig.2中的峰6。但從通過硅膠柱后獲得物質質量來看，產物1（63毫克）和產物4（63.5毫克）的量最多。因此，代謝產物3′-DMAG因合成量較低，根本無法通過菌株ARC-2轉化底物牛蒡苷元來大量獲得。對于產物3′-DMAG而言，迄今國內外尚未見能將底物牛蒡苷元只轉化為3′-DMAG的報道；有關化合物3′-DMAG的化學合成雖在2011年有過報道，但反應需要有惡臭和強刺激性的物質吡啶來合成（遼寧中醫藥大學學報,?13（4）:30-33,?2011），合成過程對人體健康危害較大，且化學合成所需成本較高，基于此原因，目前國內外市場尚無3′-DMAG銷售。由于化合物3′-DMAG資源匱乏，有關其生理活性方面研究報道較少，目前僅一篇文獻報道3′-DMAG除具有與AG相似的抗炎活性外，還表現出不同于AG的一些生理功能，如相同濃度下3′-DMAG對雌激素受體的親和力明顯強于AG（Molecules,?18:?1122-1127,?2013）。隨著3′-DMAG生理功能研究的不斷深入，今后極有可能將3′-DMAG開發為不同于目前牛蒡子藥效的其他新藥。?

發明內容

本發明提供一種布勞特菌（Blautia?sp.）AUH-JLD56及其在牛蒡苷元轉化中的應用，此菌株能將中藥牛蒡子中的牛蒡苷元（AG）粗品高效轉化為3′-DMAG，解決了3′-DMAG資源缺乏的問題，對3′-DMAG?藥理活性及新藥研發具有極大的推動作用。?

本發明所采取的技術方案是：?

一種布勞特菌（Blautia?sp.）AUH-JLD56，保藏號為CGMCC?No.8032。

布勞特菌Blautia?sp.?AUH-JLD56（KF374935）是從人糞樣中分離得到的一株革蘭氏陽性嚴格厭氧細菌菌株，該菌株在厭氧工作站內能將中藥牛蒡子提取物的酸水解物粗品（即牛蒡苷元粗品）高效轉化為3′-DMAG。有關3′-DMAG微生物生物合成途徑如下所示：?